Medicazioni rigide contro medicazioni morbide per amputazioni transtibiali

Le medicazioni fanno parte della gestione postoperatoria di routine delle persone dopo l’amputazione transtibiale. Sono comunemente usati due tipi di medicazioni ; morbido medicazioni (ad esempio bende elastiche, bende crepe) e rigidimedicazioni (ad esempio non rimovibili rigidi medicazioni , rimovibili rigidi medicazioni , immediati Protesi postoperatorie). Le medicazioni morbide sono la scelta di medicazione convenzionale in quanto sono economiche e facili da applicare, mentre lemedicazioni rigide sono costose, richiedono più tempo per essere applicate e richiedono personale qualificato per applicare le medicazioni . Tuttavia, medicazioni rigide è stato suggerito di provocare una più rapida guarigione della ferita a causa dell’esterno duro che fornisce un maggior grado di compressione al moncone.

Obiettivi

Valutare i benefici e i danni delle medicazioni rigide rispetto alle medicazioni morbide per il trattamento delle amputazioni transtibiali.

Metodi di ricerca

Nel dicembre 2018 abbiamo cercato il registro specializzato delle ferite di Cochrane, il registro centrale delle prove controllate di Cochrane (CENTRAL), MEDLINE ovale, Embid ovale, EINA CINAHL Plus, AMID ovale e PEDro per identificare gli studi pertinenti. Per identificare ulteriori studi pubblicati, non pubblicati e in corso, abbiamo anche cercato i registri di studi clinici, la letteratura grigia, gli elenchi di riferimento di studi pertinenti e recensioni identificate nelle ricerche precedenti. Abbiamo utilizzato la funzione di ricerca di riferimento citata sul Web of Science di ThomsonReuters e contattato le persone e le organizzazioni pertinenti. Non ci sono state restrizioni per quanto riguarda la lingua, la data di pubblicazione o l’impostazione dello studio.

Criteri di selezione

Abbiamo incluso studi randomizzati controllati (RCT) e quasi-RCT che hanno arruolato persone con amputazioni transtibiali. Non c’erano restrizioni sull’età dei partecipanti e le ragioni per l’amputazione. Le prove che hanno messo a confronto l’efficacia delle medicazioni rigide con le medicazioni morbide sono state l’obiettivo principale di questa recensione.

Raccolta e analisi dei dati

Due revisori hanno esaminato in modo indipendente titoli, abstract e pubblicazioni a testo integrale per studi idonei. Due autori di revisioni hanno anche estratto in modo indipendente i dati sulle caratteristiche e sugli esiti dello studio e hanno eseguito il rischio di bias e valutazioni GRADE.

Risultati principali

Abbiamo incluso nove RCT e quasi-RCT che hanno coinvolto 436 partecipanti (441 arti). Tutti gli studi hanno reclutato partecipanti da ospedali acuti e / o riabilitativi provenienti da sette diversi paesi (Stati Uniti, Australia, Indonesia, Tailandia, Canada, Francia e Regno Unito). In tutti gli studi tranne uno, è stato chiaramente affermato che le amputazioni erano secondarie alle condizioni vascolari.

Risultati primari

La guarigione delle ferite

Non siamo sicuri che le medicazioni rigide riducano il tempo di guarigione delle ferite rispetto alle medicazioni morbide (MD -25,60 giorni, IC 95% -49,08-2,22, uno studio, 56 partecipanti); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di parzialità e una volta per grave imprecisione. Non è chiaro se le medicazioni rigide aumentino la percentuale di ferite guarite rispetto alle medicazioni morbide (RR 1,14, IC 95% da 0,74 a 1,76, uno studio, 51 partecipanti); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di bias e due volte per un’imprecisione molto grave.

Eventi avversi

Non è chiaro se le medicazioni rigide aumentino la proporzione di eventi avversi correlati alla pelle rispetto alle medicazionimorbide (RR 0,65, IC 95% da 0,32 a 1,32, I 2 = 0%, sei studi, 336 partecipanti (340 arti)); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di parzialità e una volta per grave imprecisione.

Non è chiaro se le medicazioni rigide aumentino la proporzione di eventi avversi non correlati alla pelle rispetto alle medicazionimorbide (RR 1,09, IC 95% da 0,60 a 1,99, I 2 = 0%, sei studi, 342 partecipanti (346 arti)); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di parzialità e una volta per grave imprecisione. Inoltre, non siamo certi che lemedicazioni rigide riducano il tempo a nessun dolore rispetto alle medicazioni morbide (MD -0.35 settimane, 95% CI -2.11-1.14, uno studio di 23 partecipanti); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di bias e due volte per un’imprecisione molto grave.

Risultati secondari

Non siamo sicuri se le rigide medicazioni riducano il tempo di camminare rispetto alle medicazioni morbide (MD -3 giorni, 95% CI -9,96-3,96, uno studio, 56 partecipanti); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di bias e due volte per un’imprecisione molto grave. Siamo anche incerti se le medicazioni rigide riducono la durata della degenza ospedaliera rispetto alle medicazioni morbide (MD -30.10 giorni, 95% CI -49.82 a -10.38, uno studio, 56 partecipanti); evidenza di certezza molto bassa, declassata due volte per un rischio molto elevato di parzialità e una volta per grave imprecisione. Inoltre non è chiaro se le medicazioni rigideridurre il tempo necessario per la prescrizione e il gonfiore delle protesi rispetto alle medicazioni morbide , poiché i risultati si basano su prove di certezza molto basse, declassate due volte per un rischio molto elevato di bias e una / due volte per l’imprecisione grave / molto grave. Nessuno degli studi ha riportato risultati sul comfort del paziente, sulla qualità della vita e sui costi.

Conclusioni degli autori

Non siamo sicuri dei benefici e dei danni delle medicazioni rigide rispetto alle medicazioni morbide per le persone sottoposte ad amputazione transtibiale a causa di prove di certezza limitata e molto bassa. Non è chiaro se le medicazioni rigide siano superiori alle medicazioni morbide per migliorare gli esiti correlati alla guarigione delle ferite, eventi avversi, prescrizione protesica, funzione di deambulazione, durata della degenza e gonfiore. Medici devono esercitare il giudizio clinico come il tipo di medicazione usano e considerare i pro ei contro di ciascuna per i pazienti (ad esempio pazienti ad alto rischio di caduta può beneficiare della protezione offerta da una rigida medicazione e pazienti con scarsa integrità cutanea possono avere meno rischi di rottura della pelle da una medicazione morbida).

[Tratto da: www.cochranelibrary.com ]

Come sbarazzarsi di unghie incarnite, secondo podologi e pedicuristi

Ora che siamo entrati nella stagione dei sandali e stiamo diventando reattivi con i nostri piedi nudi , la questione di unghie incarnite antiestetiche e dolorose sembra particolarmente pertinente. Gli incarnati si verificano quando l’angolo dell’unghia (di solito sull’alluce ) inizia a crescere nella pelle, causando infiammazione, dolore e potenzialmente infezioni. Come dice il podologo Dr. Ernest L. Isaacson , “Se pensi di avere un’unghia incarnita, probabilmente hai ragione.”

Secondo il dottor Cary Zinkin, un podiatrist e portavoce dell’Associazione Podiatric Medical americana , ci sono quattro cause principali di unghie incarnite: calzature troppo strette, traumi alla punta del piede (come se la si strofina male), taglio inappropriato ed ereditarietà. I primi tre possono essere prevenuti, ma ci sono alcune persone che sono semplicemente incline alle mocche “a causa della forma della radice dell’unghia e del modo in cui la pelle le gira intorno”, dice Zinkin. In questi casi, raccomanda di consultare un podologo per una procedura semplice in cui viene rimossa una parte dell’unghia per prevenire ulteriori incarnite.

Zinkin consiglia anche a chiunque abbia un diabete o una cattiva circolazione di vedere un podologo se ha un’unghia incarnita, perché potrebbe rapidamente progredire verso una pericolosa infezione. Come spiega il podologo Krista Archer , se l’incarnato non viene trattato, “il bordo tagliente dell’unghia può perforare la pelle e formare un piccolo foro attraverso il quale i batteri entrano, causando un’infezione”. Persone sane senza segni di infezione (come il rossore , calore, gonfiore o odore ), tuttavia, può prendersi cura delle unghie incarnite a casa – e i prodotti di seguito, scelti da cinque podologi e pedicuristi, possono aiutare.

…. per leggere l’articolo completo e in lingua originale digitare il link sotto.

[Tratto da: www.nymag.com ]

La collaborazione interprofessionale

La pelle umana offre una copertura protettiva e una forma di identificazione personale, e attraverso i suoi cambiamenti naturali e normali rivela le prove del processo di invecchiamento nel corso della vita. 1 È facile dare per scontato l ‘”usura” che la pelle sopporta senza smettere di apprezzare il suo ruolo vitale nella vita e nel vivere, così come durante la morte e la morte. Con una stretta osservazione della pelle, gli operatori sanitari possono acquisire nuove informazioni sul mondo interno ed esterno di una persona.

La pelle offre la prima impressione visiva di una persona e può riflettere non solo lo stato di salute fisico di una persona, ma anche l’interazione dinamica di fattori emotivi e culturali; può persino annunciare l’avvicinarsi della morte. Prendi in considerazione i comuni idiomi associati alla pelle come “morbida come la pelle di un bambino”, “la bellezza è profonda”, “pelle spessa”, “confortevole nella pelle”, “sotto la pelle”, “nessuna pelle dalla mia schiena” , “” mostrami un po ‘di pelle “o” pelle e ossa “. Anche in modo informale, la pelle è multidimensionale nelle informazioni che fornisce.

Questo articolo accrescerà la comprensione della pelle da parte dei professionisti della salute, sfidandoli a visualizzare la pelle in modo più olistico, estendendo la loro capacità di eseguire una valutazione multidimensionale e aumentando il riconoscimento del bisogno di interventi non solo specifici per la disciplina, ma anche interprofessionali collaborazione correlata alla cura dell’intera persona.

ARGOMENTO DI STUDIO

CJ, 42 anni, era un uomo attivo ed energico con diversi impegni in programma in un dato giorno. Era un dilettante, con la passione per fare pezzi di scacchi in legno; le cicatrici sulle sue mani erano indicative dei suoi errori occasionali. Sebbene gli fosse stato diagnosticato il diabete mellito di tipo 2, era florido e viveva per il brivido di cavalcare le onde come un surfista professionista. Biondo e biondo, la sua pelle non protetta bruciò rapidamente e spesso sotto il sole implacabile. Persino il cuore e la croce tatuati sulla sua spalla in ricordo di sua madre stavano svanendo. CJ non ha mai ripensato alla sua pelle fino a quando un giorno ha notato una zona marrone in rilievo sull’avambraccio sinistro. Lo liquidò come una lentiggine normale. Nel corso di diversi mesi, la sua “lentiggine” iniziò a cambiare. Crebbe fino alle dimensioni di un pisello, elevato,

CJ andò da un dermatologo e fu informato che aveva il melanoma maligno ( Figura 1 ), una forma grave di cancro della pelle. La sua visione della vita è stata istantaneamente cambiata. Ormai impaurito dal sole, non andava più a surfare e si preoccupava di proteggere la sua pelle durante tutte le attività all’aria aperta, compreso indossare camicie a maniche lunghe, un cappello e una forte protezione solare. Fu continuamente monitorato per la progressione della malattia e ora era preoccupato per le infezioni della pelle ai piedi a causa del suo diabete. CJ si era reso conto che la sua pelle non era una semplice copertura, ma era parte integrante di tutti gli aspetti della sua vita e salute e che il danno alla sua pelle aveva implicazioni potenzialmente mortali.

 

Figura 1 - Clicca per ingrandire in una nuova finestra Figura 1. MELANOMICO AMELANOTICO NODULO Da Goodheart HP, MD. Photoguida di Goodheart dei disturbi della pelle comuni. 2a ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins; 2003.

DIMENSIONI FISICHE

Da una prospettiva evolutiva, le osservazioni della pelle sono rilevanti dalla nascita fino alla morte. La pelle di ogni neonato viene esaminata per le voglie, che possono sbiadire nel tempo o diventare un segno di identificazione personale, nonché per anomalie congenite, come una labbro leporino ( Figura 2 ). Oltre a valutare l’integrità della pelle neonatale, i professionisti esaminano anche la distribuzione dei capelli, la qualità, la consistenza e l’umidità della pelle. Lanugo, i capelli fini che ricoprono il corpo di un feto, riflette l’età gestazionale. Mentre lo sviluppo continua, l’influenza degli ormoni nell’adolescenza porta alla crescita dei capelli nelle zone dell’ascella e del pube. Anche il sudore e le ghiandole sebacee della pelle si attivano, causando sudorazione e spesso con conseguenti livelli variabili di acne.

 

Figura 2 - Clicca per ingrandire in una nuova finestra Figura 2. LABBRA LISCIA E PALATO CHIUSO IN UN INFANTEDEL NOMINARIO STYMAN DI NAD J. STEDMAN. Philadelphia, PA: Wolters Kluwer, 2012.

Con l’avanzare dell’età, la pelle perde l’elasticità della giovinezza, diventando ruvida e secca, con linee sottili e ammiccamenti profondi derivanti da una perdita di grasso sottocutaneo e / o disidratazione. “Macchie di età” o macchie di pelle compaiono, in particolare sul viso e sulle mani, insieme a ingrigimento, diradamento o perdita di capelli, rivelando l’età.

Indipendentemente dall’età della persona, la pelle rivela lo stato nutrizionale di una persona, con una dieta ben bilanciata e un’idratazione adeguata con conseguente qualità della pelle eccezionale, mentre una cattiva alimentazione e idratazione risultano in una pelle secca e screpolata che è suscettibile di lacrime e infezioni . La pelle indica anche sensibilità o allergie a cibi, allergeni ambientali o farmaci in base all’improvvisa presenza di arrossamento della pelle, orticaria o eruzione cutanea.

Nel corso della vita, la pelle è anche soggetta a lesioni meccaniche, come abrasioni, lacrime, lacerazioni, incisioni chirurgiche o cicatrici di guerra e aggressioni fisiche. La pelle può anche subire lesioni termiche, come ustioni di primo, secondo o terzo grado risultanti da trattamenti termici o freddi o di radiazioni estremi e lesioni chimiche da contatto con sostanze chimiche caustiche della pelle. La pelle può anche essere danneggiata dalla chemioterapia, che colpisce la pelle, i capelli e altre cellule che si dividono rapidamente. Queste lesioni possono lasciare il loro segno e riflettere la storia della vita, forse con un grado associato di trauma emotivo.

Attraverso la valutazione della pelle, i medici diagnosticano malattie o condizioni di salute che riflettono disturbi metabolici, ematologici, ormonali, endocrini, autoimmuni o infettivi. Ad esempio, la pelle può indicare segni di insufficienza renale, con cristalli uremici evidenti sulla pelle; lividi causati da disturbi del sangue; sudorazione causata da vampate di calore indotte da ormoni durante la menopausa; secchezza cutanea associata a disfunzione tiroidea; un’eruzione della farfalla vista con il lupus eritematoso; o sudore cutaneo indicativo di febbre e infezione. 2

La valutazione della cute è anche di fondamentale importanza nell’identificare e differenziare le lesioni cutanee benigne (come le lentiggini) da lesioni maligne (come i carcinomi a cellule basali o squamose) a tumori della pelle più pericolosi per la vita (come il melanoma o il sarcoma di Kaposi). Inoltre, i cambiamenti nel colore della pelle possono essere associati a malattie degli organi, come l’ingiallimento della pelle (ittero) associato a malattia del fegato o ostruzione del dotto biliare ( Figura 3).), bluing della pelle (cianosi) indicativo di ipossia associata a problemi respiratori o cardiaci, pallore cutaneo riflettente di scarsa perfusione ematica da malattia vascolare periferica o anemia, o arrossamento della pelle associato a infiammazione o infezione. È importante che gli operatori sanitari prendano nota e documentino i cambiamenti, le condizioni o le anomalie della pelle, come nevi, macule, papule, noduli, pustole, placche, pustole, vescicole, bolle, croste, ulcerazioni, escoriazioni, macerazione, angiomi di ciliegia, o porpora senile, che ha una serie di implicazioni sulla salute. 3

 

Figura 3 - Clicca per ingrandire in una nuova finestra Figura 3. JAUNDICEFrom Bickley LS, Szilagyi P. Bates ‘Guide to Physical Examination and History Taking. 8 ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins; 2003.

Poiché le osservazioni visive della pelle sono fatte e documentate oggettivamente, i professionisti devono chiedere i sintomi soggettivi associati di dolore nocicettivo somatico, descritti come sensazioni palpitanti, doloranti, pungenti, di oppressione, di bruciore, di formicolio o di “spilli e aghi”. Il disagio dell’asciugatura della pelle (xerosi) può anche essere accompagnato dal sintomo soggettivo del prurito (prurito). Se non trattata, la xerosi o il prurito possono aumentare l’incidenza di lacrime, infezioni e lesioni da pressione della pelle. 4 Dopo ulteriori domande, il professionista può apprendere che questa gamma di descrittori soggettivi può anche essere associata a cambiamenti nello stato funzionale di una persona o nella sua qualità di vita.

Come con qualsiasi altro organo, il danno si accumula nel tempo, causando la rottura della pelle. Il cambiamento estrinseco, noto come “fotoaggio”, è un danno causato dall’esposizione ad agenti ambientali come luce UV o fumo. 1Altri fattori esterni, come il lavaggio eccessivo della pelle, possono causare traumi cutanei, mentre la mancanza di igiene può portare all’accumulo di microbi e patogeni, creando un rischio maggiore di infezione della pelle. 4

DIMENSIONI EMOTIVE

Il derma e la psiche sono strettamente intrecciati dal punto di vista funzionale, perché gli esseri umani non possono vivere senza la loro pelle sia fisicamente che emotivamente. 5 La pelle può riflettere le emozioni; per esempio, arrossire o diventare rosso può riflettere imbarazzo. Questa complessa connessione mente-pelle è stata definita psicodermatologia o medicina psicocutanea . 6 Le condizioni o le malattie della pelle possono influenzare l’immagine corporea di una persona perché il nostro corpo influenza il modo in cui gli altri ci vedono. 5 L’ideale sociale di una pelle perfetta, liscia e impeccabile può sottoporre le persone con malattie della pelle o malattie a sentirsi meno attraenti, stigmatizzate, ostracizzate, imbarazzate e depresse. 7

Osservando la pelle, i fornitori possono essere in grado di osservare se un individuo ha disturbi emotivi o angoscia. Ad esempio, lo stress può causare l’esacerbazione di alcune condizioni della pelle, come la psoriasi, l’herpes e l’acne. 2 Secondo McCance e Huether, 2 un’epidemia di pelle di herpes può essere scatenata dallo stress, causando l’apparizione delle vescicole altamente contagiose sulla pelle. Gli individui con vitiligine, ferite acute, cicatrici o stomi possono ritenere che la loro pelle sia soggetta al controllo e al giudizio degli altri. Pertanto, possono sentire la necessità di nascondere o coprire la pelle con indumenti e avere una maggiore incidenza di morbilità psicologica, qualità della vita compromessa e ideazione suicidaria. 7

Un drammatico esempio di visibile sofferenza emotiva è il taglio della pelle. Klonksy 8 ha esaminato l’automutilazione della pelle sotto forma di taglio o bruciore della pelle, concludendo che gli adulti impegnati in queste attività cercavano modi per alleviare gli stressanti quotidiani. Altri comportamenti, come la rotazione dei capelli o la presa delle unghie, sono anche manifestazioni di stress o di stress.

Al contrario, prendersi cura della propria pelle è correlata all’immagine positiva del corpo, a un minor numero di sintomi depressivi ea comportamenti salutari di auto-cura. 9 Ad esempio, una persona può proteggere attivamente la sua pelle dalla luce solare e dall’esposizione ai raggi UV, impegnarsi in pratiche alimentari salutari ed esercitare se valuta il proprio corpo e ha sentimenti positivi di accettazione, protezione, amore e rispetto. 9 Spesso l’igiene della pelle o la sua mancanza possono avere un ruolo nel modo in cui la persona è vista dagli altri, poiché la pulizia è spesso associata a un senso di dignità personale. 4

DIMENSIONI PSICHOCOCIALI

La dimensione psicosociale della pelle si riferisce al tatto e al contatto pelle a pelle ed è una componente fondamentale della salute per tutta la vita. La pelle funge da uno dei principali meccanismi attraverso i quali comunichiamo e inizia o continua il processo di legame quando nasciamo ( Figura 4 ). Molti studi hanno riportato l’importanza del contatto pelle a pelle e di come “la cura del canguro” aiuta i neonati a regolare la propria respirazione, la frequenza cardiaca, la temperatura e molte altre funzioni corporee semplicemente trattenendoli. 10

 

Figura 4 - Clicca per ingrandire in una nuova finestra Figura 4. INCOLLA ATTRAVERSO LA PELLE CON LA PELLE CONTACTPhoto di Wayne Evans.

As we age, our skin is a main contributor to a sense of belonging and acceptance. Adolescents place great importance on appearance and feel pressured to have clear, smooth skin to be accepted by their peers. According to Kottner,11 a person’s confidence level and interaction with others is closely related to how they think they look. Physical disfigurement is daunting, from the appearance of a miniscule pimple to the horrifying reality of third-degree burns. Sensitivity and coping mechanisms, as well as social support, are part of the survival process for those who must endure significant skin damage or disfigurement.

Inoltre, il modo in cui la pelle sente e gli odori possono anche influenzare la vita sessuale o intima di una persona. La morbidezza della pelle è parte dell’attrazione sessuale, mentre l’odore della pelle di una persona può identificarsi come la sua firma. Con l’età, la diminuzione dell’idratazione e della lubrificazione cutanea può portare a rapporti dolorosi con irritazione vaginale e peniena. 12 Come la pelle del seno di una donna inizia a flettere, o con altre condizioni della pelle, può sentirsi meno attraente e meno incline a impegnarsi in intimità sessuale. 7

L’isolamento sociale si verifica quando le condizioni della pelle sono contagiose. Le condizioni della pelle, come la scabbia, possono essere diffuse attraverso il contatto fisico e possono causare l’isolamento delle persone in isolamento medico. I bambini piccoli con la varicella, un’altra malattia della pelle altamente contagiosa, sono spesso separati da coetanei sani per prevenire la trasmissione. Inoltre, la cura o l’igiene della pelle e delle unghie possono riflettere lo stato socioeconomico di un individuo in relazione all’accesso alle strutture di balneazione o ai prodotti per la cura personale.

Da una prospettiva psicosociale, i rituali legati alla pelle, come il tatuaggio, l’arte della pelle o il piercing della pelle, possono esprimere il desiderio di individualismo di una persona. La pelle e i capelli sono aspetti della bellezza percepita di una persona, con implicazioni su come un individuo è valutato, trattato o desiderato sessualmente. Inoltre, le condizioni della pelle possono indicare influenze ambientali correlate al lavoro o al lavoro di una persona. Ad esempio, chi lavora all’aperto può avere danni alla pelle dovuti al sole, al freddo o al vento; sostanze chimiche ambientali aggressive possono far sembrare anziana anzitempo qualcuno. Sul lato positivo, è necessaria una moderata esposizione della pelle al sole per produrre un’adeguata vitamina D, che è importante per la salute delle ossa.

È importante sottolineare che la pelle può informarci sulla possibilità di abuso fisico o negligenza. Lividi, tagli o ustioni inspiegabili possono indicare che un individuo è vittima di abusi fisici. Un articolo che parlava di visite pediatriche al pronto soccorso descriveva come certi schemi di “bruciature al torace e al braccio con bordi ondulati” indicavano il versamento di liquido bollente su un bambino. 13 La negligenza fisica di bambini, anziani o persone con disabilità può essere rivelata da una scarsa igiene e dall’odore corporeo, che mettono gli individui a rischio di gravi infezioni.

Tuttavia, i praticanti non dovrebbero affrettarsi a giudicare; le varie cause dei difetti della pelle devono essere considerate. Lividi sulla pelle di un bambino può essere un segno di nascita, attribuibile a una caduta nel parco giochi, o un segno di malattia; i praticanti non dovrebbero presumere che sia stato causato da una brutta presa o da uno schiaffo da parte di un genitore violento. In questo esempio, l’attenzione può essere sulle dimensioni fisiche della salute del bambino basate sulla storia medica, sull’esame fisico e sui dati di laboratorio; tuttavia, le circostanze si prestano a una revisione delle cartelle cliniche del bambino per la prova di precedenti abusi.

DIMENSIONI SPIRITUALI CULTURALI

Come forma di identificazione culturale, razziale o etnica, l’informazione viene dedotta dall’aspetto fisico di una persona, inclusa la consistenza e il colore della pelle e dei capelli. Ad esempio, un individuo con pelle chiara, capelli biondi e occhi azzurri può essere considerato di discendenza europea, mentre la pelle marrone scuro, i capelli neri e gli occhi marroni possono indicare la discendenza africana o indiana. Uno studio condotto da Chan et al. 14 a Singapore ha rilevato che la maggior parte dei pazienti con vitiligine, un tipo di decolorazione della pelle, è diventata socialmente isolata. Gli individui con vitiligine hanno riportato una perdita di senso di identità a causa della loro pelle unica e distintiva, che ha portato all’isolamento sociale autoimposto. 14

La cultura gioca un ruolo chiave nel modo in cui viene percepito l’aspetto esteriore di una persona, come l’importanza relativa di mantenere un aspetto giovanile, o in termini di quanto la pelle sia appropriata per essere rivelata in pubblico. In molte culture, il valore e la bellezza di una persona possono essere associati alla luminosità o all’oscurità del colore della loro pelle. 15 Ad esempio, gli ombrelli vengono utilizzati in molte culture asiatiche perché la pelle bianca e pallida è preferita alla pelle abbronzata.

Le culture occidentali tendono a concentrarsi sull’aspetto giovanile e sulla rimozione di difetti della pelle o imperfezioni. Aziende cosmetiche, dermatologi e chirurghi plastici, sottolineano l’importanza di mantenere o riacquistare un aspetto giovanile per vendere cosmetici o prodotti o procedure mediche che pretendono di creare un aspetto più giovanile. Molte culture orientali, tuttavia, valorizzano e rispettano il processo di invecchiamento e le relative linee di pelle o rughe, e gli anziani sono venerati per le loro esperienze vissute e saggezza.

Alcune culture o religioni enfatizzano la modestia e possono imporre che la pelle sia coperta di vestiti. Ad esempio, le donne nelle culture del Medio Oriente possono essere soggette a punizione se qualsiasi area della pelle è esposta in pubblico. 16 Al contrario, alcuni abiti tradizionali indiani lasciano un ombelico nudo e alcune culture europee permettono di prendere il sole nudi sulle spiagge pubbliche. In Giappone, generazioni di donne e uomini vanno alle terme insieme per fare il bagno e il relax.

Coprire la pelle e indossare un particolare tipo di abbigliamento (abitudini) sono importanti per alcuni ordini religiosi di suore. I monaci buddisti radono la testa, rivelando la pelle sulla testa, come segno esteriore di devozione e apprezzamento del minimalismo. Questo può essere paragonato ad altre culture che apprezzano l’estetica dell’abbigliamento o altre forme di ornamenti della pelle.

La relazione tra spiritualità e cultura si riflette nei rituali legati alla pelle. Le tribù native americane tatuano la loro pelle in onore dei loro antenati o dei di Dio, mentre nella cultura giapponese, i tatuaggi sono spesso visti sfavorevolmente e non sono consentiti in molte situazioni lavorative. Nel giudaismo, la rimozione del prepuzio di un bambino da un rabbino o da un suo rappresentante è considerata un atto sacro. 17I rituali di purificazione della pelle sono importanti anche per quelli della fede ebraica ortodossa e per la fede musulmana. Nel giudaismo ortodosso, le donne fanno bagni rituali alla mikva alla fine delle loro mestruazioni mensili per purificarsi. In entrambe le fedi ebree e musulmane, ci sono rituali di balneazione al momento della morte. Questi rituali devono essere eseguiti da un membro appropriato della fede che possiede la conoscenza delle procedure culturalmente corrette per mostrare rispetto per la cura del corpo e prepararlo per la sepoltura definitiva. 18

DIMENSIONI DI FINE VITA

La pelle riflette non solo l’invecchiamento durante tutta la vita, ma rivela anche esteriormente i processi di vita e di morte. Alla fine della vita, molti organi iniziano a fallire perché non riescono più a svolgere le loro funzioni. Levine 19 ritiene che la pelle debba essere studiata come parte della sindrome da disfunzione multiorganica, che si verifica in presenza di ipotensione, anemia, insufficienza cardiaca e insufficienza renale e porta a ipoperfusione e necrosi definitiva della pelle e delle strutture e dei tessuti sottostanti. In questo contesto, l’insuccesso della pelle può essere inevitabile anche quando sono in atto interventi preventivi.

Sebbene gli specialisti delle ferite riconoscano che esiste un fallimento della pelle, è stata continuata la discussione sulla delineazione, sulla convalida e sull’accettazione universale del concetto di insufficienza cutanea. 20 L’insufficienza cutanea viene talvolta discussa come entità separata dalle lesioni da pressione, mentre alcune ricerche considerano le lesioni da pressione come una manifestazione di insufficienza cutanea nel contesto dell’insuccesso di più organi. 19 Le lesioni da pressione, che sono una preoccupazione per le strutture post-acute e di assistenza a lungo termine, possono condividere alcuni degli antecedenti e delle caratteristiche con l’insufficienza cutanea; tuttavia, la persona può essere malata in modo critico o cronico ma non morire. 19

Le manifestazioni cliniche comuni di degradazione cutanea in pazienti a fine vita comprendono ulcere terminali di Kennedy (KTU), che sono caratterizzate da un’ulcera a forma di farfalla, pera o ferro di cavallo, localizzata tipicamente sui glutei o sul coccige ( Figura 5 ) che ha un insorgenza estremamente rapida, che si verifica tra 6 e 48 ore prima della morte. 21 Per migliorare l’analisi scientifica della KTU, un gruppo di esperti ha identificato cambiamenti della pelle alla fine della vita che includono segni e sintomi di deperimento, mobilità ridotta, perdita di peso o appetito, disidratazione, perdita o rottura dell’integrità della pelle, lacrime della pelle, diminuzione dell’immunità, segni di infezione (es. sepsi) o perdita di rifornimento vascolare. 21

 

Figura 5 - Clicca per ingrandire in una nuova finestra Figura 5. ULCER TERMINALE KENNEDY Da Sussman C, Bates-Jensen B. Wound Care.Philadelphia, PA: Wolters Kluwer; 2011.

Un terzo tipo di lesione cutanea terminale, la lesione del tessuto terminale di Trombley-Brennan, si riferisce a aree di lividi su prominenze ossee che hanno chiare linee di demarcazione e un colore rosso-porpora profondo visibile sulla colonna toracica o lombare o sugli arti inferiori. 21 Levine 22 afferma che l’insufficienza cutanea è il comune denominatore delle ferite che si verificano vicino alla morte e che queste ulcere potrebbero essere definite ulcere terminali , ma se la ferita si verifica prima della fase attiva o attiva della morte, il termine appropriato è la lesione da pressione .

Il cambiamento della pelle alla fine della vita è di interesse per la comunità palliativa e ospizio perché questo tipo di ulcerazione cutanea è stato identificato come una parte normale del processo di morte, preannunciando le fasi di morte attiva e attiva. L’incidenza di qualsiasi tipo di ulcera è legata all’aumento della mortalità e della morte per l’aumento della fragilità e dell’onere della malattia. Quando viene rilevata una KTU, i tassi di mortalità aumentano, schizzano alle stelle dal 20,8% entro 30 giorni dall’individuazione al 73,3% dopo 1 anno. 23 E ‘stato riportato che il 62,5% degli infortuni di pressione si trovano in pazienti hospice si è verificato nelle ultime 2 settimane di vita. 23Così, se la morte è inevitabile, forse KTUs sono anche inevitabili e non indicano necessariamente assistenza infermieristica di scarsa qualità o negligenza.

COLLABORAZIONE INTERPROFESSIONALE E CURA INTERA-PERSONA

Con la consapevolezza che la pelle comunica informazioni multidimensionali sulla vita fisica, emotiva, psicosociale e culturale-spirituale di una persona, i professionisti della salute devono rendersi conto che ogni dimensione della pelle è rilevante per la cura dell’intera persona e può richiedere non solo la cura individuale discipline sanitarie, ma anche l’esperienza di un team interprofessionale. Ad esempio, sebbene possa essere richiesta una consultazione con un dermatologo per una lesione cutanea, un’eruzione o una rottura, il dermatologo potrebbe aver bisogno di consultare un assistente sociale o uno psicologo se la pelle indica autolesionismo o segni di abuso o negligenza da parte di un custode .

Per fornire assistenza all’intera persona, i pazienti e gli operatori sanitari possono trarre beneficio dall’educazione e dal counseling per comprendere l’interazione dinamica di tutte le dimensioni della pelle e gli interventi olistici per migliorare il benessere e la qualità della vita. Sebbene l’acne severa, che frequentemente si verifica negli adolescenti, possa richiedere interventi farmacologici da parte di medici o infermieri di pronto intervento, gli educatori e gli psicologi scolastici possono svolgere un ruolo nell’insegnamento dell’igiene e nell’aiutare gli adolescenti a far fronte alle cicatrici associate. Per gli individui con malattie o malattie della pelle, i professionisti possono anche fornire informazioni riguardanti i gruppi di supporto di persona o online e altre risorse. I fornitori dovrebbero anche fornire ai pazienti informazioni sui trattamenti alternativi che consentono ai pazienti di essere coinvolti attivamente nelle loro cure, il che può alleviare l’ansia e l’angoscia.

Una valutazione multidimensionale della pelle consentirà la determinazione di diagnosi che vanno da malattie della pelle, malattie degli organi, squilibrio di liquidi ed elettroliti, disagio emotivo, alterazioni dell’immagine del corpo o sofferenza spirituale, solo per citarne alcuni. Ogni diagnosi può richiedere terapie farmacologiche, non farmacologiche e / o complementari. Il trattamento olistico delle condizioni della pelle può richiedere l’uso di farmaci per curare la malattia o per ridurre segni e sintomi in presenza di malattie della pelle incurabili o croniche. Il sollievo dal dolore è importante e può essere fornito mediante l’uso di farmaci per il dolore, impacchi freddi o tecniche di rilassamento o immagini guidate per alleviare lo stress associato. Prevenzione, gestione,

Al momento non esistono strumenti o strumenti per la valutazione della pelle che comprendano gli aspetti multidimensionali della pelle. La comunità sanitaria riconosce l’importanza della prevenzione delle lesioni cutanee o della rottura e il valore degli strumenti di valutazione della pelle per identificare i pazienti ad alto rischio. Ad esempio, la scala di Braden valuta i fattori di rischio associati allo sviluppo di una lesione da pressione, prendendo in considerazione i deficit di percezione sensoriale del paziente, i livelli di attività fisica, la mobilità, l’umidità, la nutrizione, l’attrito e il taglio. Il punteggio Braden Scale può guidare i clinici verso l’attuazione di determinati interventi, come alleviare la pressione sulle prominenze ossee, aumentare l’attività fisica e la mobilità, ridurre l’attrito e il taglio durante lo spostamento dei pazienti, migliorare la nutrizione e condurre specifici protocolli di gestione delle ferite.24

Lo sviluppo di uno strumento multidimensionale per la valutazione della pelle sarebbe utile anche per documentare la salute generale di una persona nella sua cartella clinica elettronica, con l’accesso portatile attraverso le impostazioni e la riflessione dei cambiamenti nella salute del paziente nel tempo. Ad esempio, un tale strumento potrebbe mostrare non solo il progresso della malattia o il fallimento di un multiorganismo, ma anche l’interfaccia della salute fisico-emozionale-sociale-spirituale. La discussione delle informazioni ottenute da questo strumento con la famiglia di un paziente potrebbe rafforzare, ad esempio, che le ulcere terminali possono verificarsi nonostante un’assistenza infermieristica meticolosa o la cura della famiglia. Inoltre, la valutazione quantificata potrebbe portare all’identificazione precoce, al trattamento e all’educazione riguardo l’insuccesso della pelle alla fine della vita e contribuire ad alleviare il disagio emotivo oi sensi di colpa. 25 La valutazione permanente della pelle offre ai membri del team interprofessionale l’opportunità di educare, consolare e sostenere la famiglia e di prepararsi per i rituali culturali o spirituali di fine vita.

CONCLUSIONI

La pelle fornisce una grande quantità di informazioni sulla salute di una persona, specialmente alla fine della vita. Una valutazione approfondita della pelle del paziente da una prospettiva multidimensionale consente agli operatori sanitari di fornire cure sensibili, informate e basate sull’evidenza.

La pelle rappresenta non solo la prima linea di difesa di una persona, ma anche una forma di comunicazione tra una persona e il suo mondo. Nel corso della vita di una persona, la pelle riflette l’integrità di una persona e fornisce informazioni preziose agli operatori sanitari nella comprensione dell’interfaccia tra il mondo interno ed esterno di una persona.

[Tratto da: www.nursingcenter.com ]

Conferenza sulla prevenzione delle lesioni da pressione 26 Giugno 2019

Conferenza sulla prevenzione delle lesioni da pressione

26  Giugno 2019,  presso l’Auditorium di S. Paolo del IRCCS Bambino Gesù di Roma, inserita nel contesto del Congresso INoEA.

La partecipazione Infermieristica è gratuita.

Per il programma basta cliccare sul link:

http://www.aislec.it/news/inoeainpat-fate-eat-2019-conferenza-sulla-prevenzione-delle-lesioni-da-pressione/

 

 

I risultati di Footcare possono essere migliorati se vengono introdotti percorsi

“Forti prove indicative” indicano che i cambiamenti appropriati nei percorsi di cura pertinenti possono portare a un rapido miglioramento degli esiti clinici nella cura del diabete, un articolo è concluso.

C’è un “bisogno urgente” di migliorare la variazione dell’assistenza nel tentativo di evitare esiti negativi relativi alle ulcere del piede diabetico, hanno detto i ricercatori nella rivista Diabetes Care.

Il professor William Jeffcoate, del NHS Trust degli ospedali della  Nottingham University , ha condotto l’  articolo di tipo commentario  scritto da esperti del Regno Unito e degli Stati Uniti, che ha indagato perché le ulcere del piede restano un importante problema sanitario in tutto il mondo, nonostante i notevoli progressi nel trattamento negli ultimi 25 anni .

I ricercatori hanno anche detto che il tasso di sopravvivenza a cinque anni, dopo la presentazione con una nuova ulcera del piede, è dell’ordine del 50-60% e peggiore di quello di molti tumori comuni.

Lo studio ha affermato che i rapporti dichiarati fino a un terzo della spesa per il diabete riguardavano problemi relativi agli arti inferiori negli Stati Uniti.

Trattamenti esistenti

Il team di scrittura ha commentato una serie di problemi, come l’efficacia dei trattamenti esistenti, l’incidenza di amputazione maggiore, nuove ulcerazioni dopo la guarigione e strategie specifiche per ridurle.

Hanno esaminato il motivo per cui le prove basate su ulcere del piede diabetico sono così scarse, dicendo che è un “argomento che in genere non è riuscito ad attirare lo stesso livello di interesse da parte degli operatori sanitari come altre complicazioni del diabete”.

Sono state suggerite diverse raccomandazioni. Hanno incluso importanti investimenti nella conduzione di studi clinici di alta qualità che sono “necessari per migliorare la base di prove per l’assistenza clinica di routine” e per garantire che i responsabili della “progettazione e consegna delle cure per le persone con ulcere del piede diabetico siano conformi a tali guida basata sull’evidenza disponibile “.

Hanno anche suggerito che occorre prestare attenzione alla struttura del percorso assistenziale, affermando “ci sono forti prove suggestive per indicare che i cambiamenti appropriati nei percorsi di cura pertinenti possono portare a un rapido miglioramento dei risultati clinici”.

I ricercatori hanno aggiunto: “Le prove disponibili suggeriscono che miglioramenti considerevoli possono accompagnare cambiamenti strutturali nel modo in cui i professionisti lavorano e nel modo in cui viene erogata l’assistenza.

“Le evidenze disponibili suggeriscono che tali cambiamenti strutturali dovrebbero concentrarsi su  1 ) la creazione di percorsi chiari per consentire la valutazione precoce delle ulcere del piede diabetico da un servizio specialistico multidisciplinare e  2 ) la fornitura di sorveglianza strutturata e assistenza per coloro che hanno avuto un’ulcera del piede diabetico e sono in remissione dopo la guarigione.

“Se le comunità adottano queste iniziative, dovrebbe essere possibile innescare un sostanziale miglioramento dei risultati relativi alle ulcere del piede diabetico. La cura del piede ha bisogno di metamorfosi da una sottospecialità a una “superspecialità” del diabete. “

[Tratto da: www.diabeticfootonline.com ]

Ulcera del piede diabetico o ulcera da pressione? Questa è la domanda

La creazione di una corretta diagnosi collega la cura alle linee guida stabilite e sostiene tutte le successive attività terapeutiche. I problemi possono sorgere quando le definizioni di malattia si sovrappongono, come nel caso delle ulcere del piede diabetico e delle ulcere da decubito sul piede che si verificano nelle persone con diabete. In questi casi, i medici devono assicurarsi che i pazienti ricevano un pacchetto di cura che riconosca sia la causa della ferita (pressione e taglio) sia la patologia sottostante (neuropatia diabetica, potenziale frattura dell’architettura del piede e ischemia). Tutti i pazienti con diabete che hanno ulcerazioni del piede, indipendentemente dall’eziologia della ferita, dovrebbero quindi essere visti dal team di piede diabetico multidisciplinare. L’assistenza può quindi essere ottimizzata per includere valutazioni appropriate, inclusa la valutazione della perfusione periferica, lo scarico corretto, la gestione diabetica appropriata,

Ulcerazione

“Che cosa c’è in un nome? Quella che chiamiamo una rosa con qualsiasi altro nome avrebbe un odore altrettanto dolce.”  – Romeo e Giulietta (II, ii, 1-2)

A differenza di un gioco shakespeariano, in cui un nome è visto come una convenzione artificiale e priva di significato, l’intera base per gestire la malattia di un paziente è stabilire una diagnosi o un nome per la malattia. Una volta che un professionista sanitario ha nominato un problema, segue una strategia di trattamento – spesso presentata in linee guida specifiche. Il nome di un’ulcera è, quindi, la chiave per la sua successiva gestione.

Cos’è un’ulcera da pressione?
Secondo le linee guida dell’European Pressure Ulcer Advisory Panel (EPUAP) (EPUAP e Nation Pressure Ulcer Advisory Panel, 2014), un’ulcera da pressione è definita come: “Una lesione localizzata alla pelle e / o al tessuto sottostante di solito sopra una prominenza ossea, come risultato di pressione, o pressione in combinazione con taglio. “Sebbene sia inteso per essere specifico, questa definizione è ampia. Comprende danni alla pelle e ai tessuti profondi causati da pressione e / o taglio, indipendentemente dalla condizione medica di base del paziente o dal meccanismo con cui si è verificato il danno. La definizione di EPUAP prosegue affermando: “Un numero di fattori contributivi o di confondimento sono anche associati alle ulcere da pressione; il significato di questi fattori deve ancora essere chiarito.

Questa definizione di ulcere da pressione include danni alla pressione che si verificano alla fine della vita, a volte denominati “ulcere di Kennedy” (Schank, 2009), e comprende anche trauma della fasciatura o danno della fascia compressiva, ulcerazione da dispositivi come maschere di ossigeno o tubi nasogastrici , cateteri urinari o di altro tipo e danni da pressione e taglio da calchi in gesso o calzature.

La maggior parte degli studi sulla prevalenza dell’ulcera da pressione (Barczak et al., 1997; Clark et al., 2004; Vangilder et al., 2008; Vowden e Vowden, 2009a) identificano l’area del tallone come la seconda localizzazione più frequente per un’ulcera da pressione; sacro. Il calcagno rappresenta tra il 23% e il 28% di tutte le ulcere da pressione (Barczak et al., 1997; Clark et al., 2004; Vangilder et al., 2008; Vowden and Vowden, 2009a; 2009d) ed è il sito più frequente per le ulcere da pressione in specifici sottogruppi di pazienti, ovvero i malati critici, gli anziani e le persone con diabete.

Salcido et al (2011) affermano che il tallone è l’area più comune per le lesioni dei tessuti profondi. Le ulcere da pressione sul tallone si trovano comunemente nelle strutture di assistenza sia acuta sia a lungo termine (Vangilder et al, 2008), sono frequentemente associate alla guarigione ritardata della ferita (Chipchase et al, 2005; Pickwell et al, 2013) e hanno un impatto significativo sui pazienti “qualità della vita” (Spilsbury et al, 2007). In un piccolo studio retrospettivo su 57 pazienti, Han e Ezquerro (2011) hanno riportato che il 42% (18 pazienti) dei casi di ulcere da pressione al tallone richiedeva l’amputazione dovuta a infezione persistente o non-guarigione.

Cos’è un’ulcera del piede diabetico? 
Nel consenso internazionale sul piede diabetico (International Working Group on the Diabetic foot, 2007), un’ulcera del piede diabetico è definita come: “Una ferita a tutto spessore sotto la caviglia in un paziente diabetico, indipendentemente dalla durata. Necrosi cutanea e cancrena sono anche incluse nel sistema attuale come ulcere “. Questa definizione è simile a quella di EPUAP, all-inclusive e, come tale, qualsiasi ulcera da pressione sul piede di una persona con diabete è un’ulcera diabetica del piede – così come qualsiasi ferita traumatica, inclusa una lesione termica o chimica. Costituisce parte del “piede diabetico”, un gruppo di complicanze correlate tra cui infezione, ulcerazione, neuropatia e arteriopatia periferica che pone il piede a rischio di amputazione (Apelqvist, 2014).

Definizioni
contrastanti Questa sovrapposizione tra definizioni causa problemi nei percorsi di gestione delle ferite. Descrivere e classificare una ferita aiuta a guidare le successive strategie di gestione e le esigenze terapeutiche dei medici. Ad esempio, una ferita alla gamba descritta come un’ulcera venosa verrà sottoposta a terapia di compressione con appropriate indagini venose in linea con le linee guida NICE per le patologie venose (NICE, 2013). Il sistema di classificazione completa per i disturbi venosi cronici (Eklof et al, 2004) consente anche una descrizione dettagliata dell’ulcera e della patologia sottostante.

Identifying a wound as a pressure ulcer does not offer such a detailed descriptive classification system – limiting the classification to wound depth and exposed tissue type — but should still activate a care pathway that is in line with the National Institute for Health and Care Excellence (NICE) guidance for pressure ulcer treatment (NICE, 2014). This triggers risk and skin assessment, enhanced pressure relief and repositioning, but does not define a specific wound care strategy or identify care-supporting investigations. However, it does trigger prevalence and incident reporting, investigation and analysis of the root cause.

L’identificazione di una ferita come ulcera del piede diabetico può determinare una definizione descrittiva più dettagliata dell’ulcera (Abbas et al, 2008) e dovrebbe anche portare a un percorso assistenziale che segua la guida NICE (NICE, 2004; 2011). Ciò includerà un riferimento tempestivo al team multidisciplinare per la cura del piede diabetico, dove verrebbero eseguite la valutazione della perfusione periferica, dello stato neuropatico, del debridement della ferita e del callus, e lo scarico appropriato con cura generale del piede e delle unghie, oltre alla revisione della gestione del diabete.

Una guida diversa per ogni tipo di ferita ha un impatto sulla fornitura di assistenza. Il Bradford Wound Care Audit (Vowden e Vowden, 2009a; 2009b; 2009c; 2009d; Vowden et al, 2009) ha evidenziato le differenze che si verificano nella gestione quando l’ulcera del piede tra le persone con diabete è classificata come un’ulcera da pressione o un’ulcera del piede diabetico ( Figure 1a e b ). Le persone con diabete nella comunità che hanno avuto un’ulcera da pressione del tallone piuttosto che un’ulcera del piede diabetico non hanno ricevuto la valutazione vascolare periferica Doppler, non sono state indirizzate al servizio del piede diabetico e, pertanto, non hanno ricevuto i benefici della cura generale del piede, scarico o referto ortottico.

Il meccanismo di lesione sia nell’ulcera da pressione che nell’ulcera del piede diabetico è spesso simile ( Figura 2 ) e ciò può comprensibilmente portare a problemi nell’assegnazione di un tipo di ferita a una ferita specifica.

Chadwick, commentando un sondaggio sulla prevalenza delle ulcere da pressione nel suo ospedale locale che ha mostrato un aumento maggiore del previsto delle ulcere da pressione, ha scoperto che il personale del reparto contava ulcere del piede diabetico come ulcere da pressione e ha concluso che il personale stava lottando per differenziare tra le ulcere da pressione e ulcere del piede diabetico (Ousey et al, 2011). Nello stesso articolo, Cook ha commentato: “Il vero problema non è se l”etichetta’ della ferita sia corretta, ma che il paziente riceva l’assistenza più appropriata attraverso la valutazione e il corretto invio entro un breve lasso di tempo a uno” specialista “in quel la zona.”

Anche se non direttamente rilevanti per una discussione in relazione alla denominazione delle ferite del piede tra le persone con diabete, ci possono essere differenze istologiche e trascrizionali tra ulcere del piede diabetico e ulcere da pressione. Mendoza-Mari et al (2013) hanno dimostrato che nelle cellule del tessuto di granulazione dell’ulcera del piede diabetico si manifesta un “imprinting” molecolare verso il fallimento dell’omeostasi del glucosio.

Indipendentemente dal nome applicato all’ulcera del piede, qualsiasi ferita non cicatrizzante sul piede dovrebbe innescare una valutazione dettagliata della perfusione periferica dell’arto. La dipendenza da impulsi palpabili e un indice di pressione caviglia-brachiale Doppler potrebbe non essere sufficiente. Il concetto di angioletto del piede e della parte inferiore della gamba (Wright and Fitridge, 2014) dimostra l’importanza di identificare la perfusione regionale nell’area ulcerata e, quando possibile, ripristinare la perfusione pulsatile in linea in quella regione.

Conclusione
Quando è un’ulcera del piede diabetica un’ulcera da pressione e quando queste ulcere dovrebbero essere incluse nei dati sulla prevalenza dell’ulcera da pressione? Queste sono domande a cui molti clinici fanno fatica. L’ampiezza della definizione di ulcere da pressione potrebbe essere interpretata come comprendente la maggior parte delle ulcere neuropatiche e neuroiscemiche diabetiche in quanto la rottura della pelle, il danno o l’ulcerazione sono solitamente causati da pressione o da taglio.

L’opinione degli autori è che le persone con diabete con un’ulcera o una ferita sul piede dovrebbero avere il beneficio della valutazione da parte di un team multidisciplinare specializzato e percorsi di trattamento stabiliti dai servizi del piede diabetico, indipendentemente dal nome inserito sull’ulcera. I pazienti con ulcere sul tallone sono, come gruppo, molto probabilmente classificati come affetti da ulcere da pressione. Questi pazienti spesso combattono con mobilità ridotta e scarsa guarigione e spesso non riescono a trarre beneficio dall’intervento della squadra a piedi nella loro gestione.

Un efficace lavoro e comunicazione tra professionisti sanitari è essenziale per consentire l’implementazione di cure complesse per le persone con ulcere del piede. Per ottimizzare i risultati, tutte le persone con ulcerazioni del piede dovrebbero beneficiare del contributo di un team di assistenza ai piedi. Troppi operatori sanitari si concentrano esclusivamente sulla gestione della ferita e ignorano i benefici dell’assistenza integrata che seguono il coinvolgimento multidisciplinare del team.

TABELLE E FIGURE

Figura 1a Figura 1b figura 2

Pronto soccorso. Pronte le nuove linee guida.

Nuovi codici numerici per la definizione delle priorità e nuovi standard per l’Osservazione breve intensiva e azioni per ridurre il sovraffollamento tra cui il blocco dei ricoveri programmati e l’implementazione del bed management. Sono queste le direttrici su cui si muovono le nuove linee guida elaborate dal Tavolo di lavoro istituito presso il Ministero della Salute ed inviate alle Regioni.

Nuovi codici di priorità per il Triage. Nel modello proposto dal Ministero si adotta un sistema di codifica a 5 codici numerici di priorità, con codice da 1 a 5. “La nuova codifica – sottolinea il Ministero – consente di focalizzare l’attenzione sulle condizioni cliniche che rientrano nell’ambito dell’urgenza differibile, individuando l’ambito delle patologie da definire come urgenza minore”.  L’implementazione della codifica a 5 codici numerici di priorità e il conseguente superamento della codifica con i codici colore dovrà avvenire progressivamente entro 18 mesi dalla pubblicazione del documento.

Le linee guida precisano poi che la “suddivisione in 5 codici di priorità, allo scopo di meglio ridistribuire la popolazione che si presenta in PS. Infatti, il “codice verde”, essendo di gran lunga il più attribuito, non consente di differenziare adeguatamente i pazienti meritevoli di maggior impegno assistenziale da quelli a minore carico gestionale, esponendoli al rischio di eventi sfavorevoli o di sottovalutazione”.

Allo stesso modo “l’utilizzo di una numerazione da 1 a 5 per definire i codici di accesso, in sostituzione dei colori, allo scopo di evitare la confusione con altri codici colore (rosa, argento et altri), non indicativi di una priorità d’accesso, ma di un percorso dedicato”. Inoltre “l’utilizzo del codice di priorità esclusivamente per l’individuazione della priorità di accesso alle cure e la presa in carico del paziente avviene al Triage e non coincide necessariamente con l’inizio della visita medica”. L’implementazione della codifica a 5 codici numerici di priorità e il conseguente superamento della codifica con i codici colore dovrà avvenire progressivamente entro 18 mesi dalla pubblicazione del presente documento.

Per una corretta gestione del percorso diagnostico-terapeutico dei pazienti che accedono al P.S. si raccomanda un tempo ottimale di 6 ore e comunque non superiore alle 8 ore dall’arrivo, anche nel caso di presentazioni cliniche complesse, in aderenza a quanto evidenziato nella letteratura internazionale.

Il Triage. Il documento costituisce un aggiornamento delle Linee di indirizzo sul Triage emanate con l’Accordo SR del 2003 e, nel ridefinire la funzione di Triage, sviluppa le possibilità organizzative, in linea con i recenti dati di letteratura internazionale e con l’attuale fase di ridisegno del nostro sistema sanitario, allo scopo di migliorare la presa in carico del paziente e l’inizio del trattamento urgente.

Il Triage è l’inizio del percorso di Pronto Soccorso ed ha due obiettivi:
– individuare le priorità di accesso alle cure;
 indirizzare il paziente all’appropriato percorso diagnostico-terapeutico

Nel documento si ribadisce che il Triage in Pronto Soccorso “è una funzione infermieristica effettuata da personale con appropriate competenze e attuata sulla base di linee guida e protocolli in continuo aggiornamento. L’infermiere di Triage è dotato di autonomia professionale, in relazione alle competenze acquisite durante il corso di formazione, può essere specificatamente autorizzato alla somministrazione di alcuni farmaci, all’esecuzione di prelievi ematici ed all’inizio di trattamenti, qualora queste attività siano previste da protocolli interni.

Percorsi rapidi (Fast Track, See and Treat)
Il See and Treat è un modello di risposta assistenziale alle urgenze minori che si basa sull’adozione di specifici protocolli medico-infermieristici condivisi per il trattamento di problemi clinici preventivamente definiti. Il paziente viene preso in carico in una determinata area del pronto soccorso dall’infermiere in possesso di formazione specifica che applica le procedure previste da protocolli condivisi e validati, assicura il completamento del percorso e può essere specificamente autorizzato alla somministrazione di alcuni farmaci. Si tratta di un modello di risposta assistenziale alle urgenze minori di pertinenza mono specialistica.

Percorso pediatrico
Si spiega come particolare attenzione dovrà essere dedicata alla rilevazione e al trattamento del dolore pediatrico. Per questo motivo, dovranno essere disponibili ed utilizzate, correttamente e costantemente, dall’infermiere addetto al triage le scale validate del dolore pediatrico, specifiche per fasce d’età.

Linee guida Osservazione breve intensiva (OBI). Ma non solo triage, nel documento sono anche definiti vari aspetti di continuità all’ interno del percorso di cura del paziente in Pronto Soccorso, OBI, ricovero, individuando i limiti temporali delle prestazioni.

“L’OBI – si legge – costituisce una modalità di gestione delle emergenze-urgenze per pazienti con problemi clinici acuti ad alto grado di criticità ma a basso rischio evolutivo, oppure a bassa criticità ma con potenziale rischio evolutivo, aventi un’elevata probabilità di reversibilità, con necessità di un iter diagnostico e terapeutico non differibile e/o non gestibile in altri contesti assistenziali. Dal punto di vista organizzativo l’OBI è una unità funzionale del Pronto Soccorso.

Le funzioni dell’OBI si realizzano in:
 osservazione clinica;
 terapia a breve termine di patologie a complessità moderata;
 possibilità di approfondimento diagnostico – terapeutico finalizzato al ricovero appropriato o alla dimissione.

Tempi massimi in OBI. Nelle linee guida si specifica come” l’ammissione dei pazienti in O.B.I., laddove appropriata, deve avvenire entro un tempo massimo di 6 ore dalla presa in carico e la permanenza non deve superare le 36 ore dalla presa in carico al triage”.
Il trattamento in OBI può esitare a sua volta in:
 Ricovero presso una unità di degenza della struttura ospedaliera (che inizia dall’ ora di dimissione dall’OBI) o trasferimento presso altra struttura per acuti;
 Dimissione con affidamento alle strutture territoriali o residenziali, prevedendo se necessario il controllo presso strutture ambulatoriali dell’Azienda sanitaria (follow up).

Standard strutturali dell’OBI. Le linee guida precisano come l’area di OBI “è attivata in locali dedicati ed abitualmente è collocata in posizione adiacente o comunque nelle immediate vicinanze del Pronto Soccorso. Il locale dedicato all’OBI, organizzato in strutture open-space e/o a box singoli, è opportunamente attrezzato per garantire la tutela della privacy ed il comfort del paziente”.

Nell’OBI, sia per adulti che pediatrica, oltre alla dotazione standard di materiale sanitario, sono presenti le seguenti apparecchiature:
– carrello per l’emergenza;
– monitor defibrillatore/stimolatore;
– ventilatore meccanico;
– dispositivi per la somministrazione di Ossigeno nelle diverse situazioni cliniche (maschera di Venturi, maschera ad alto flusso, CPAP – Pressione Positiva Continua nelle vie Aeree);
 elettrocardiografo;
– pompe infusionali.

Devono, inoltre, essere disponibili nell’ambito del Pronto Soccorso le seguenti apparecchiature: ecografo pluridisciplinare ed emogasanalizzatore.

Nell’OBI pediatrica devono essere presenti le dotazioni di dispositivi e apparecchiature adeguati alle diverse fasce di età. Nell’OBI ostetrica la dotazione tecnologica deve prevedere anche un ecografo multidisciplinare con sonda transvaginale (ecofast) e un apparecchio di cardiotocografia fetale.

Standard personale OBI. La postazione è l’unità dedicata al paziente ove si realizzano le attività di assistenza, diagnosi e cura, nel rispetto della privacy e del comfort. La dotazione delle postazioni dedicate all’OBI è individuata mediante il criterio di 1 postazione ogni 5.000 accessi al Pronto Soccorso

Per l’OBI pediatrica si prevedono almeno 2 postazioni per ogni U.O. di Pediatria o P.S. pediatrico, oppure 1 postazione ogni 4.000 accessi in P.S. Le postazioni di OBI sono funzionali e pertanto non devono essere considerate nella dotazione totale dei posti letto dedicati al ricovero ospedaliero.

E’ necessario dotare almeno il 50% delle postazioni di sistemi di monitoraggio multiparametrico del paziente. Inoltre si precisa che la dotazione di personale assegnato all’OBI, in modo integrato con il Pronto Soccorso, è proporzionale alle dimensioni della struttura, intendendo per dimensione il numero di postazioni operanti

Per un modulo di 5-8 postazioni, si indica come dotazione minima la presenza di una unità infermieristica nelle 24 ore e di una unità medica per almeno 8 ore diurne non continuative. Nelle ore notturne la presenza del medico è assicurata dal personale in servizio presso il Pronto Soccorso. Per quanto riguarda il personale di supporto, è altresì indicata la presenza di una unità di OSS nelle 12 ore diurne; nelle ore notturne tale risorsa può essere condivisa con il P.S.

Il personale dell’OBI opera in maniera integrata e coordinata con il restante personale del Pronto Soccorso e, ove presente, della Medicina d’Urgenza, al fine di garantire la continuità assistenziale.


Azioni per ridurre il sovraffollamento in Pronto soccorso.
In generale nel documento si definiscono le azioni che possono essere introdotte per ridurre il fenomeno e che principalmente “richiedono un’azione integrata con la rete dei servizi territoriali sanitari e sociali presenti a livello locale”.

Di seguito sono elencate le principali azioni da attuarsi a livello di rete dei servizi ospedalieri e territoriali:
– Definizione per ciascun territorio di percorsi di “affidamento diretto” per la presa in carico da parte delle Unità Operative Ospedaliere dei casi urgenti già seguiti dalle stesse (es. pazienti oncologici- nefrologici-ematologici- supporto trasfusionale-urologici).
 Definizione per ciascun territorio di percorsi per la gestione delle urgenze ambulatoriali con classe di priorità di tipo U (entro 72 ore).
– Implementazione presso ciascun Pronto Soccorso di modalità strutturate per la gestione l’informazione/indirizzamento dei pazienti verso la rete dei servizi sociali sociosanitari per percorsi complessi.
– Definizione per ciascun territorio di protocolli per l’identificazione, trattamento, dimissione e presa in carico sanitaria e/o sociale dei “frequent user”.
– Definizione per ciascun territorio di percorsi condivisi tra ospedale e territorio per la gestione del “fine vita” con particolare riferimento ai pazienti in Assistenza Domiciliare Integrata (ADI) e in strutture protette.
– Realizzare e rafforzare i servizi territoriali e soprattutto la loro capacità di intercettare quanto sarebbe inappropriato nell’ambito del Pronto Soccorso, incentivando la realizzazione di Aggregazioni Funzionali Territoriali (AFT), di Unità Complesse di Cure Primarie (UCCP) o anche di Case della salute e Ospedali di Comunità, Hospice.
– Attivazione di soluzioni volte a migliorare l’accessibilità ai servizi di continuità assistenziale, quali ad esempio l’attivazione del numero unico europeo 116117.

Ma non solo nelle linee guida si definiscono anche altre azioni specifiche:
– Adozione di protocolli per la gestione di casi clinici specifici (es.: dolore toracico, ictus
– Adozione dei percorsi di Fast Track per prestazioni a bassa complessità;
 Monitoraggio dei tempi di esecuzione e refertazione degli esami radiologici, di laboratorio e delle consulenze, per incrementare il grado di efficienza della fase di processo;
 Individuazione di percorsi dedicati per le prestazioni specialistiche rivolte al Pronto Soccorso, che devono essere separati da quelli rivolti ai pazienti degenti e ambulatoriali; inoltre, per garantire la tempestività di completamento dell’iter diagnostico in Pronto Soccorso, deve essere sempre specificato il livello di priorità distinguendo tra “emergenza” ed “urgenza”;
 Adozione di strumenti di comunicazione (sistemi informativi) volti a condividere con i servizi ed il personale coinvolto i livelli di priorità e le informazioni sullo stato di avanzamento dei percorsi;
 Rilevazione dei carichi di lavoro e adeguamento delle risorse adottando anche modalità organizzative che consentano la flessibilità degli organici attivi in funzione del reale grado di attività del servizio nei periodi di prevedibile iperafflusso;
– Adeguamento della dotazione organica di personale anche in funzione del ruolo svolto nell’ambito della rete dell’emergenza- urgenza (Pronto Soccorso, DEA I livello, DEA II livello) e della presenza di strutture quali la Medicina d’urgenza, della Terapia sub intensiva, etc …
– Attuazione di strategie di “rinforzo temporaneo” del personale medico, infermieristico e di supporto.

A prescindere da queste azioni preventive il documento suggerisce anche le azioni da mettere in atto in caso di iperafflusso:
– Definizione di un numero preordinato di posti letto, di area medica e chirurgica, quotidianamente a disposizione del Pronto Soccorso, al fine di assicurare le esigenze ordinarie di ricovero urgente di tale servizio.
 Implementazione di un cruscotto in grado di rappresentare l’effettiva situazione dei posti letto disponibili o che si renderanno disponibili in tempi brevi.
 Pianificazione di un numero di dimissioni medio pari al bisogno quotidiano del Pronto Soccorso, anche attraverso il monitoraggio della durata di degenza dei pazienti.
– Definizione di modalità che garantiscano la possibilità di dimissione dai reparti anche nei giorni prefestivi e festivi, soprattutto a ridosso del fine settimana, almeno per quei pazienti che dispongano già o non richiedano un percorso di presa in carico a livello territoriale.
– Adozione di specifiche procedure organizzative aziendali e interaziendali che garantiscano il rapido back transfer dei pazienti dai centri Hub di riferimento ai centri Spoke, con l’obiettivo prioritario di decongestionare i centri a maggior afflusso di pazienti.
– Definizione di accordi di rete con i presidi ospedalieri e/o cliniche, che non hanno ruolo nella rete dell’emergenza-urgenza, per la disponibilità di posti letto per acuti e per post-acuti.
 Istituzione della stanza/area di ricovero (“Admission Room”), aree dell’ospedale ed esterne al Pronto Soccorso, dedicate ai pazienti in attesa di ricovero, come soluzione provvisoria da utilizzare nel caso di grave sovraffollamento.
– Definizione di percorsi che consentano nelle situazioni più gravi, di operativa h possibilità di ricovero in altro presidio ospedaliero, previa verifica della reale disponibilità del Posto Letto, e senza interferire significativamente con l’attività di accettazione Pronto Soccorso / Ospedale.
– Definizione di percorsi ambulatoriali post-Pronto Soccorso per la presa in carico del paziente al fine di garantire una dimissione sicura e una minore percentuale di re-ingressi in Pronto Soccorso.
– Blocco temporaneo dei ricoveri programmati o non urgenti per un intervallo di tempo rapportato alla severità del sovraffollamento. Inizialmente la soluzione dovrà interessare le Unità Operative dell’area medica, compresa l’area medico-specialistica, e in seconda istanza le Unità Operative dell’area chirurgica.

Bed Management. Nel documento riveste particolare rilevanza l’implementazione delle funzioni di Bed Management, all’ottimizzazione all’utilizzo della risorsa “posto letto” mediante un puntuale e metodico governo delle fasi di ricovero e di dimissione.

“L’istituzione della funzione del Bed Management – si legge – rappresenta un elemento di facilitazione nel processo di governo dei flussi del paziente in ospedale e rappresenta una funzione della Direzione Aziendale tesa ad assicurare il coordinamento e l’integrazione tra logistica, aree produttive ospedaliere e percorsi diagnostici terapeutici. Al momento non c’è un unico modello di riferimento per la funzione di Bed Management, in quanto ogni realtà deve rispondere con proprie risorse umane, logistiche e tecniche, tuttavia tale funzione rappresenta un’espressione di integrazione professionale medico-infermieristica nell’ambito di un team i cui componenti devono possedere le seguenti caratteristiche: la conoscenza approfondita dell’ospedale e la conoscenza delle esigenze operative, al fine di garantire la massima integrazione tra i percorsi di urgenza e quelli programmati”.

La funzione del Bed Management dovrà essere declinata in un regolamento che ne evidenzi le modalità organizzative e le relative attività e dovrà basarsi su alcuni capisaldi:
 verifica in tempo reale della disponibilità dei posti letto; o indicazione dei tempi di ricovero attraverso un sistema di relazione continuo con le UUOO, supportato da un cruscotto per il monitoraggio;
– verifica della programmazione delle dimissioni e della continuità delle stesse nell’arco di tutta la settimana; organizzazione di un sistema di dimissioni verso altri setting assistenziali (Post acuzie, Riabilitazione, Ospedali di Comunità, Case della Salute, ecc.);
 di concerto con la Direzione Sanitaria, procede al monitoraggio della durata della degenza dei pazienti. Sviluppare un sistema di presa in carico precoce delle “dimissioni difficili” sin dal momento del ricovero;
 monitorare i percorsi dei pazienti considerati “frequent use/ anziani fragili e socialmente difficili.

Si dovrà poi prevedere un cruscotto per il monitoraggio dei posti letto e delle dimissioni in tempo reale che dovrà interfacciarsi con il sistema informativo del Pronto Soccorso. I dati di monitoraggio, disponibili on line, saranno visibili per le Unità Operative con l’obiettivo di promuovere una collaborazione tra tutte le strutture del presidio ospedaliero. Periodicamente saranno pubblicati report sui dati di attività.

[Tratto da: www.quotidianosanita.it ]

Miele medicale e Wound Care: la produzione mediata da phytochemicals di perossido di idrogeno è fondamentale per l’elevata attività antibatterica del miele di melata

Il miele di melata è sempre più apprezzato per il suo spiccato potenziale antibatterico; tuttavia, il meccanismo sottostante e i composti responsabili della forte attività antibatterica del miele di melata sono ancora sconosciuti. Lo scopo di questo studio era di indagare l’inibizione della crescita batterica di 23 campioni di miele di melata. Attività dell’enzima glucosio-ossidasi (GOX) derivato dalle api, il contenuto di defensin-1 (Def-1) e perossido di idrogeno (H 2 O 2 ) e il contenuto totale di polifenoli sono stati determinati nei 23 campioni di miele. I nostri risultati hanno dimostrato che l’attività antibatterica del miele di melata era equivalente alla manuka medicale e al miele kanuka ed è stata abolita dal catalasi. Sebbene H 2 O 2è un fattore importante nell’inibizione della crescita batterica, i composti polifenolici e la loro interazione con H 2 O 2 sono i fattori chiave responsabili dell’elevata attività antibatterica del miele di melata. Inoltre, i nostri risultati hanno indicato che l’attività antibatterica del miele di melata non dipende dalla produzione mediata da GOX di H 2 O 2 o dalla presenza di Def-1.

Il miele di melata è prodotto da api provenienti da secrezioni ricche di zucchero di alberi e piante o essudati di insetti succhiatori di piante (Hemiptera). Oltre alle sue interessanti caratteristiche sensoriali, che differiscono dal miele di fiori, il miele di melata è apprezzato per il suo marcato potenziale antibatterico 1 . L’origine botanica del miele di melata proviene da conifere o latifoglie. Un miele di melata di abete è uno dei tipi più conosciuti di miele di melata di conifere in Europa 2 .

Il miele di melata possiede forti proprietà biologiche tra cui antibatterico 1 , 3 , 4 , antibiofilm 5 , anti-infiammatorio 6 , antiossidante 7, nonché attività di guarigione delle ferite 8 . L’attività antibatterica e antibiofilm del miele di melata è paragonabile al miele di manuka, che è attualmente utilizzato come miele per uso medico nelle applicazioni cliniche. Inoltre, un miele di melata di abete slovacco è stato clinicamente testato con successo per il trattamento delle fistole gluteo-femorali infette 9 , ulcere della gamba inferiore 10 , ulcere corneali indotte da lenti a contatto 11 e come agente profilattico per endoftalmite12 .

Il meccanismo alla base dell’attività antibatterica e antibiofilm del miele di melata non è stato completamente chiarito. È stato proposto che il perossido di idrogeno (H 2 O 2 ), prodotto dalla conversione enzimatica del glucosio nel miele diluito, e il peptide antibatterico antibatterico defensin-1 (Def-1) siano considerati i principali componenti responsabili dell’attività antibatterica di miele naturale, ad eccezione del miele di manuka 13 . Sebbene i livelli di H 2 O 2 nel miele possano differire tra i diversi tipi di miele, indipendentemente dalla loro origine botanica e geografica 14 , è stato suggerito che il miele di melata produca quantità più elevate di H 2 O 2rispetto al miele di nettare 15 . Il miele di melata è noto per un alto contenuto di acidi fenolici e flavonoidi che possiedono proprietà antiossidanti e proossidanti 16 . Pertanto, i polifenoli, alla concentrazione riscontrata nel miele di melata, potrebbero essere coinvolti nella generazione di notevoli quantità di H 2 O 17 , 18 .

Nel presente studio, abbiamo mirato a (i) determinare l’attività antibatterica dei campioni di miele di melata slovacco contro i due patogeni della ferita più frequentemente isolati, (ii) indagare il meccanismo di come il miele di melata inibisce la crescita batterica e (iii) chiarire il contributo di Def-1 e glucosio ossidasi (GOX) -mediata attività antibatterica H 2 O 2 all’attività antibatterica complessiva del miele di melata.

Attività antibatterica del miele di melata

I valori minimi di concentrazione inibitoria (MIC) di 23 campioni di miele di melata rispetto ai ceppi batterici testati sono mostrati in Fig.  1 . I campioni di miele erano più efficaci contro lo S. aureo Gram-positivo rispetto al P. aeruginosa Gram-negativo . Per S. aureus , i valori MIC dei campioni di miele variavano dal 2,0 al 12,5%. Le MIC di miele contro P. aeruginosa variavano dal 7,5 al 15%. I campioni di miele n. 4-8 possedevano la più forte attività antibatterica contro i batteri testati.

Figura 1
Figura 1

Attività antibatterica di campioni di miele di melata (n = 23) e manuka di grado medico e miele di kanuka contro isolati di Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa . L’attività è stata determinata con un dosaggio di concentrazione minima inibente (MIC). La MIC è stata definita come la più bassa concentrazione di soluzione di miele (%) che inibisce la crescita batterica. K, miele kanuka; M, tesoro manuka.

Oltre alla determinazione della MIC, è stata valutata una concentrazione minima battericida (MBC) di campioni di miele. I valori di MIC e MBC erano comparabili e i profili complessivi inibitori e battericidi dei campioni di miele erano identici (figura  S1 ).

Il miele Kanuka e Manuka, entrambi utilizzati come mieli di grado medico, hanno mostrato un’attività antibatterica comparabile o meno efficace rispetto ai campioni di miele di melata. Simile al miele di melata, entrambi i tipi di miele della Nuova Zelanda erano più efficaci contro S. aureus di P. aeruginosa .

Confronto tra attività GOX e produzione di H 2 O 2 in campioni di miele

L’attività GOX determinata in soluzioni di miele al 20% variava da 21 a 50 mU / ml in tutti i campioni di miele di melata, con un valore medio di 35,7 mU / ml (figura  2A ). L’attività enzimatica più bassa è stata monitorata in entrambi i tipi di miele medico (<20 mU / ml), suggerendo che il metilgliossale, presente in entrambi i campioni, può aver modificato strutturalmente l’enzima GOX. La concentrazione di H 22 in campioni di miele di melata è stata determinata in soluzioni di miele al 40% e variava da 0,3 a 3,4 mM dopo un’incubazione di 24 ore a 37 ° C (Figura  2B ). Il valore medio della concentrazione di H 2 O 2 era di 1,8 mM. Due campioni di miele di melata (n. 16 e n. 21) hanno mostrato una produzione debole di H 2 O 2, con valori inferiori a 1 mM. Come previsto, il miele di kanuka e manuka ha accumulato i livelli più bassi di H 2 O 2 . Nessuna correlazione significativa è stata trovata tra i valori dell’attività GOX e la concentrazione di H 2 O 2 tra i campioni di miele di melata (r = 0,26, P  = 0,22). Pertanto, abbiamo ipotizzato che altri composti di origine botanica presenti nel miele di melata partecipino alla produzione di H 2 O 2 . I potenziali candidati responsabili degli elevati livelli di H 2 O 2 includono composti fenolici.

figura 2
figura 2

Produzione di glucosio ossidasi (GOX) e produzione di perossido di idrogeno (H 2 O 2 ) in campioni di miele di melata (n = 23) e manuka medicale e miele kanuka. ( A ) L’attività GOX è stata determinata in soluzioni di miele al 20% (peso / volume) con un kit di dosaggio GOX. ( B ) La produzione di H 2 O 2 è stata misurata in campioni di miele al 40% (peso / volume) con un kit di dosaggio GOX modificato. I dati sono espressi come valori medi con errore standard della media (SEM).

Contenuto totale di polifenoli e Def-1 in campioni di miele

Def-1 è una chiave, ma quantitativamente variabile, fattore antibatterico nel miele. Il contenuto di Def-1 è stato esaminato nei campioni di miele 2,5, 5 e 10% in PBS, utilizzando l’ELISA competitivo di recente sviluppo ei risultati sono stati espressi come percentuale delle proteine ​​totali (Figura  3A ). La quantità di Def-1 in ciascun campione di miele, incluso il miele kanuka e manuka, è mostrata in Fig.  3A . I due campioni di miele di melata # 9 e # 10 contenevano la quantità massima di Def-1. Analogamente alla capacità di produzione di H 2 O 2 , il miele di Manuka e Kanuka aveva il contenuto più basso di Def-1 tra tutti i campioni testati. Il contenuto complessivo di Def-1 nei campioni di miele di melata non era correlato alla loro attività antibatterica nei confronti di S. aureus (r = 0,17,P  = 0,45). Def-1, alla concentrazione osservata nei campioni di miele di melata, non ha esercitato la sua attività antibatterica alle MIC dei campioni di miele di melata. I dati ottenuti suggeriscono anche che l’azione antibatterica del miele kanuka e manuka dipende dal metilgliossale o da altri composti botanici sconosciuti piuttosto che da fattori antibatterici derivati ​​da api.

Figura 3
Figura 3

Contenuto di defensin-1 (Def-1) e polifenolo totale in campioni di miele di melata (n = 23) e manuka medicale e miele kanuka. ( A ) Il contenuto di Def-1 è stato quantificato in campioni di miele usando un test immunoassorbente indiretto competitivo legato agli enzimi ed i risultati sono stati espressi come percentuale delle proteine ​​totali. ( B ) Il contenuto totale di polifenoli (TP) è stato determinato con un kit di dosaggio di quantificazione dei contenuti fenolici di Folin Ciocalteu in soluzioni di miele di melata al 20% (peso / volume). L’acido gallico (GAE) è stato utilizzato come composto standard di riferimento ei risultati sono stati espressi come equivalenti GAE (mg / ml). I dati sono espressi come i valori medi con errore standard della media (SEM).

Un’attività antibatterica diretta dei composti fenolici non è stata dimostrata poiché le loro concentrazioni nel miele sono troppo basse per determinare l’attività complessiva. Tuttavia, i composti fenolici possono agire in sinergia tramite l’azione pro-ossidativa generando livelli elevati di H 2 O 2 nel miele, che media l’inibizione della crescita batterica come risultato dello stress ossidativo. Il contenuto fenolico totale determinato nelle soluzioni di miele di melata al 20% (p / v) è mostrato in Fig.  3B .

Contributo dei composti antibatterici derivati ​​dalle api all’attività antibatterica del miele di melata

Per studiare il contributo dei composti antibatterici derivati ​​dalle api all’attività antibatterica complessiva del miele di melata, i campioni sono stati trattati con un enzima proteolitico, la proteinasi K. Durante il trattamento con proteinasi K, tutto il contenuto proteico nelle soluzioni di miele al 50% (p / v) era completamente digerito (dati non mostrati). Campioni di melata non trattata e proteinasi trattati con K sono stati sottoposti ad analisi immunoblot di GOX e Def-1. Come previsto, GOX e Def-1 erano presenti in tutti i campioni non trattati (Fig.  4 ). D’altra parte, non sono state osservate bande immunoreattive per GOX e Def-1 in campioni trattati, confermando l’efficacia proteolitica della proteinasi K.

Figura 4
Figura4

Rilevazione di glucosio ossidasi (GOX) e defensin-1 (Def-1) in campioni di miele di melata (n = 23) e manuka di grado medico e miele di kanuka dopo trattamento con proteinasi K mediante immunoblotting. Aliquote (15 μl) di soluzione di miele al 50% (p / v) con o senza proteinasi K sono state risolte mediante elettroforesi su gel dodecil solfato-poliacrilammide (SDS-PAGE) e 16,5% Tricine-SDS-PAGE. Dopo la procedura di blotting semi-secco, la membrana bloccata è stata incubata durante la notte con un anticorpo policlonale di coniglio contro honey-API GOX o Def-1 (1: 2000). Vengono mostrate le macchie ritagliate. (Le macchie con le linee di taglio indicate sono mostrate nella figura supplementare  S2). Bande immunoreattive sono state rilevate in soluzione contenente compresse di SigmaFast 3,3-diamminobenzidina disciolte (GOX) o rilevate utilizzando un kit Immobilon Western (chemiluminescenza) potenziata (Def-1) potenziato.

I valori MIC sono stati determinati in campioni di miele trattati non trattati con proteinasi K. Non sono stati identificati cambiamenti significativi nei valori di MIC tra miele non trattato e trattato con proteinasi contro entrambi i batteri testati (Fig.  5 ), suggerendo che i componenti derivati ​​da api, incluso H 2 O 2 GOX-mediato , non sono responsabili per la marcata attività antibatterica delle miele di miele. Sebbene H 2 O 2 sia un importante composto antibatterico del miele di melata, la sua fonte potrebbe essere esclusivamente di origine botanica.

Figura 5
Figure5

Attività antibatterica di campioni di miele di melata (n = 23) e manuka di grado medico e miele di kanuka in seguito al trattamento con catalasi e proteinasi K contro isolati di a ( A ) Staphylococcus aureus e ( B ) Pseudomonas aeruginosa . Le soluzioni di miele al 50% (peso / volume) sono state trattate con catalasi (2000-5000 U / mg di proteina) ad una concentrazione finale compresa tra 1000 e 2500 U / ml a temperatura ambiente per 2 ore o proteinasi K (30 U / mg) a una concentrazione finale di 50 μg / ml a 37 ° C per 30 minuti. L’attività antibatterica è stata determinata con un dosaggio di concentrazione minima inibente (MIC). La MIC è stata definita come la più bassa concentrazione di soluzione di miele (%) che inibisce la crescita batterica. K, miele kanuka; M, tesoro manuka.

Ruolo di H 2 O 2 nell’attività antibatterica del miele di melata

Per determinare il ruolo di H 2 O 2 nell’attività antibatterica del miele di melata, le soluzioni di miele al 50% (p / v) sono state trattate con catalasi per 2 ore e sono state determinate MIC. I valori MIC dei campioni di miele con o senza trattamento catalasi contro entrambi i batteri testati sono mostrati in Fig.  5 . I campioni trattati con catalasi avevano una bassa attività antibatterica con valori medi di MIC del 30%. Inoltre, in sette campioni, i valori di MIC erano superiori al 30% dopo il trattamento con catalasi. L’effetto della catalasi sui valori MIC in tutti i campioni di miele di melata era molto significativo (NumDF = 2, DenDF = 268,43, F = 2136,38, P  <0,001) ei valori previsti erano tre volte più grandi (Fig.  6) rispetto ai campioni trattati con K non trattati e non trattati. È interessante notare che variazioni statisticamente significative (NumDF = 1, DenDF = 268,27, F = 8,52, P  = 0,004)) sono state osservate dopo il trattamento con catalasi tra S. aureus e P. aeruginosa (Figura  6 ). S. aureus era più resistente alla soluzione di miele dopo la rimozione di H 2 O 2 rispetto a P. aeruginosa .

Figura 6
figure6

Rappresentazione grafica dei risultati del modello misto lineare generale con tipo di trattamento variabile di risposta, specie batteriche e la loro interazione a due vie. ( Pseudomonas aeruginosa – rosso e Staphylococcus aureus – blu) .

È interessante notare che anche la MIC del miele di kanuka dopo il trattamento con catalasi è stata modificata, suggerendo che l’attività antibatterica del miele kanuka è, almeno in parte, dovuta alla generazione di H 2 O 2 . Come previsto, nel miele di manuka non sono stati osservati cambiamenti notevoli nell’attività antibatterica. Sorprendentemente, l’attività antibatterica del miele di manuka contro P. aeruginosa dopo il trattamento con catalasi è stata persino più elevata rispetto al trattamento senza enzimi.

Nonostante il fatto che le attività antibatteriche dei campioni di miele di melata fossero comparabili, la produzione di H 2 O 2 non era uniforme. L’analisi statistica non ha mostrato alcuna correlazione tra l’attività antibatterica e il livello di H 2 O 2 nei diversi campioni di miele (r = -0,38, P  = 0,08 e r = -0,03, P  = 0,89). I campioni di miele con il livello più alto di H 2 O 2 non erano i più attivi.

Discussione

Il miele è sempre più apprezzato per la sua attività antibatterica e di guarigione delle ferite e l’efficacia come trattamento di ferite e ustioni croniche. Tuttavia, ogni miele naturale esibisce una certa attività antibatterica e solo quelli con un’attività antibatterica forte e relativamente stabile sono stati selezionati per uso medico e clinico. In questo studio, ci siamo concentrati sul miele di melata come fonte di potenziale miele di grado medico per chiarire la sua attività antibatterica e per studiare il ruolo dei componenti antibatterici derivati ​​dalle api sulla sua attività antibatterica complessiva.

Una pletora di studi ha dimostrato l’importante ruolo di Def-1 e H 2 O 2nell’attività antibatterica del miele.

Def-1 è un peptide antibatterico appartenente al gruppo degli insetti defensin che è composto da 51 aminoacidi con un peso molecolare di 5,52 kDa. Bee Def-1 è efficace contro i batteri Gram-positivi 19 , 20 , 21 ; tuttavia, alcuni studi che hanno utilizzato il recombinante Def-1 hanno anche riportato la sua attività contro i batteri Gram-negativi tra cui P. aeruginosa e Salmonella choleraesuis 22 , 23 . Secondo il nostro recente studio 24 , Def-1 è un componente comune ma quantitativamente variabile nel miele e i suoi livelli in diversi campioni di miele sono correlati con l’attività antibatterica contro S. aureus. Recentemente, Def-1 ha anche dimostrato di essere un immunomodulatore nella guarigione delle ferite, dove contribuisce positivamente alla chiusura della ferita cutanea 25 . Nel presente studio, la quantità di Def-1 nel miele di melata non era correlata con l’attività antibatterica complessiva dei campioni contro S. aureus , suggerendo che il suo contributo a basse diluizioni (5-10%) è trascurabile.

Il fattore antibatterico più importante nel miele è H 2 O 2 , che è prodotto dalla conversione mediata da GOX del glucosio in acido gluconico in condizioni aerobiche in miele diluito 26 . Pertanto, GOX svolge un ruolo importante nella generazione di H 2 O 15 . Sebbene H 22 a concentrazioni presenti nel miele non uccida i batteri, è in grado di interagire con i segnali proliferativi delle cellule batteriche, e quindi influisce sulla crescita batterica anche ad alte diluizioni di miele 27 . Alcuni ricercatori hanno suggerito che i livelli di H 2 O 2nel miele possono differire tra i tipi di miele indipendentemente dall’origine botanica e geografica 14 . Alcuni studi hanno tentato di determinare la concentrazione di H 2 O 2 in diversi campioni di miele e di valutare il suo effetto sull’attività antibatterica complessiva 15 , 27 , 28 , 29 , 30 . Molti studi hanno dimostrato una maggiore correlazione tra l’attività antibatterica contro S. aureus e la quantità di H 2 O 2 nei campioni di miele. Nel presente studio, non vi era alcuna relazione ovvia tra il livello di H 2 O 2e l’attività antibatterica dei campioni di miele di melata; i campioni di miele con il livello più alto di H 2 O 2 non erano i più attivi. L’attività antibatterica era paragonabile a tutti i campioni di miele di melata, nonostante le variazioni della concentrazione di H 2 O 2 . Inoltre, la rimozione di H 2 O 2 mediante catalasi ha alterato l’attività antibatterica, poiché l’attività dopo il trattamento con catalasi era comparabile tra tutti i campioni di miele di melata. Allo stesso modo, Roshan e collaboratori (2017) non hanno trovato alcuna relazione tra la concentrazione di H 2 O 2e l’attività antibatterica complessiva di otto diversi campioni di miele australiano. I ricercatori hanno suggerito che bassi livelli di H 2 O 2 in diversi tipi di miele possono essere il risultato della presenza di sostanze fitochimiche diverse dal metilgliossale che potrebbero contribuire all’attività generale 30 .

Assumiamo che i composti polifenolici derivati ​​dalle piante, spesso riportati in campioni di miele, possano contribuire o modulare l’attività antibatterica. In presenza di ioni metallici di transizione (Cu e Fe) e di perossidi, i polifenoli, noti antiossidanti alimentari, possono agire come proossidanti accelerando la formazione di radicali idrossilici e la rottura del filamento ossidativo nel DNA 31 . Infatti, i polifenoli funzionano in due modi per promuovere l’attività antibatterica: producendo direttamente H 2 O 2 e riducendo Fe (III) a Fe (II), che innesca la reazione di Fenton per creare specie di ossigeno reattivo più potenti come i radicali idrossili . Un fattore chiave nel determinare se i composti polifenolici mostrano proprietà antiossidanti o antibatteriche è il valore di pH 32. In condizioni debolmente alcaline (pH 7,0-8,0), i polifenoli possono esibire attività pro-ossidativa e inibire la crescita batterica. Nel presente studio, la determinazione dei valori MIC del miele e della concentrazione di H 2 O 2 è stata effettuata a pH 7,3 e 7,0, rispettivamente. In queste condizioni sperimentali, è ovvio che i polifenoli del miele di melata possono agire in sinergia e inibire la crescita batterica. Come accennato, abbiamo misurato l’accumulo di H 22 in campioni di miele diluito, ma non abbiamo trovato alcuna correlazione tra la concentrazione di H 2 O 2 e l’attività antibatterica. È probabile che oltre all’accumulo di H 2 O 2La produzione mediata dai polifenoli di radicali idrossilici nel miele di melata influisce significativamente sull’attività antibatterica complessiva. Inoltre, è stato dimostrato che l’interazione chimica dei polifenoli del miele con H 2 O 2 si traduce nella generazione di prodotti responsabili della degradazione del DNA batterico 33 . È interessante notare che H 2 O 2 da solo non è in grado di indurre rotture del DNA ma è in qualche modo coinvolto in questo processo. Sebbene H 2 O 2 sia necessario per accelerare l’auto-ossidazione dei polifenoli attraverso l’idrolisi e funge da fonte di radicali idrossilici, la concentrazione di polifenoli è un fattore critico per l’attività antibatterica.

Il contenuto totale di polifenoli è risultato essere elevato in altri studi sui campioni di miele di melata 7 , 34 , 35 . Nel presente studio, il contenuto totale di polifenoli non differiva sostanzialmente tra i campioni di miele di melata testati (ad eccezione del campione n. 15), con un valore medio di 50 mg di GAE / 100 g di miele. Sarà importante determinare il limite di concentrazione critica dei polifenoli totali per il loro comportamento come agenti pro-ossidanti.

Diversi studi hanno tentato di identificare polifenoli e flavonoidi biologicamente attivi dal miele di melata di diversa origine botanica e geografica 6 , 36 , 37 . L’acido ferulico, la quercetina, il kaempherol e il particolare acido p-cumarico erano i polifenoli più abbondanti nei mieli di melata. In studi molto recenti 38 , la combinazione di acido p-cumarico con batteriocina ha mostrato effetti sinergici contro le cellule planctoniche dei batteri di origine alimentare. Allo stesso modo, la combinazione di polifenoli vegetali e H 2 O 2 si è dimostrata più efficace contro i batteri rispetto all’H 2 O 2 da sola e può indurre reazioni correlate allo stress ossidativo nei batteri 32. È stato ipotizzato che l’effetto antibatterico dei polifenoli vegetali sia legato all’H 2 O 2 indotta dai polifenoli e ad un aumento della generazione di specie di ossigeno reattivo endogeno 39 .

Fino ad ora, nessuno studio era stato condotto per determinare il ruolo dei composti antibatterici derivati ​​dalle api nel miele di melata. Qui, abbiamo dimostrato che l’attività antibatterica del miele di melata non dipende dalla produzione mediata da GOX di H 2 O 2 o dalla presenza di Def-1. Questa è un’osservazione interessante alla luce delle attuali conoscenze riguardanti le proprietà antibatteriche del miele. Il potenziale antibatterico del miele di melata non è quindi associato alla capacità di produzione di GOX e Def-1, in particolare delle colonie di api, che ha un grande impatto sulle proprietà biologiche del miele.

In conclusione, i campioni di miele di melata testati hanno mostrato un’attività antibatterica equivalente o, in alcuni casi, più elevata rispetto a quella del kanuka e del miele di manuka di qualità medica. Questa forte attività antibatterica fu abolita dal trattamento con catalasi. Sebbene l’H 2 O 2 sia un fattore importante nell’inibizione della crescita batterica, i fitofarmaci come i composti polifenolici e la loro interazione con H 2 O 2 sono i fattori chiave responsabili dell’attività antibatterica del miele di melata. Inoltre, i nostri risultati indicano che l’attività antibatterica del miele di melata non dipende dalla produzione mediata da GOX di H 2 O 2 o dalla presenza di Def-1.

Materiali e metodi

Campioni di miele

I campioni di miele (n = 28) raccolti nel 2016 sono stati ricevuti da apicoltori di diverse regioni della Slovacchia. I campioni sono stati selezionati in base al loro valore di conduttività elettrica (Codex Alimentarius, Bogdanov 2002). Cinque campioni sono stati esclusi dallo studio, in quanto non rispondevano ai criteri per il miele di melata. Complessivamente, sono stati utilizzati 23 campioni di miele di melata per ulteriori analisi. I campioni di miele sono stati anche confrontati con miele di qualità medica, Manuka Honey MGO 550 acquistato da Manuka Health (Nuova Zelanda) e crudo kanuka honey (HLKN1, n. 5054), gentilmente fornito dal Dr. Shaun Holt (honeylab, Nuova Zelanda).


Microrganismi

L’attività antibatterica dei campioni di miele è stata valutata contro gli isolati Pseudomonas aeruginosa CCM1960 e Staphylococcus aureusCCM4223, ottenuti dal Dipartimento di Microbiologia medica, Università medica slovacca (Bratislava, Slovacchia). Questi isolati batterici sono i due patogeni più frequentemente isolati dalle ferite.


Determinazione dell’attività antibatterica del miele

L’efficacia antibatterica dei campioni di miele è stata valutata con un dosaggio di concentrazione minima inibente (MIC) come descritto da Bucekova et al . (2014). In breve, la coltura batterica durante la notte è stata sospesa in soluzione salina tamponata con fosfato (PBS), pH 7,2, e la torbidità della sospensione è stata regolata a 10 8 unità formanti colonia (CFU) / ml e diluita con terreno di brodo Mueller-Hinton (MHB) (pH 7,3 ± 0,1) a una concentrazione finale di 10 6 CFU / ml. Quindi, 10 μl di aliquote di sospensione sono state inoculate in ciascun pozzetto di piastre sterili di polistirene a 96 pozzetti (Sarstedt, Germania). Il volume finale di ciascun pozzetto era di 100 μl, composto da 90 μl di terreno sterile o miele diluito e 10 μl di sospensione batterica. Dopo 18 ore di incubazione a 37 ° C, l’inibizione della crescita batterica è stata determinata monitorando la densità ottica a 490 nm. La MIC è stata definita come la più bassa concentrazione di miele che inibisce la crescita batterica. Tutti i test sono stati eseguiti in triplicato e ripetuti tre volte.

Le diluizioni seriali di ciascun campione di miele sono state preparate da una soluzione di miele al 50% (peso / volume), ottenendo concentrazioni finali di 45, 35, 30, 25, 20, 18, 16, 14, 12, 10, 8, 6 e 4%.

Oltre alla determinazione MIC, l’MBC è stato valutato in campioni di miele 40 . La vitalità dei batteri nei pozzetti senza torbidità è stata determinata distribuendo 100 μl su una piastra di agar MHB e incubando a 37 ° C per 24 ore. Il miele più basso che non ha portato alla sopravvivenza di batteri vitali è stato registrato come MBC.


Trattamento enzimatico di campioni di miele con catalasi e proteinasi K

Le soluzioni di miele al 50% (peso / volume) sono state trattate con catalasi (2000-5000 U / mg di proteina, Sigma-Aldrich, Regno Unito) ad una concentrazione finale compresa tra 1000-2500 U / ml a temperatura ambiente per 2 ore o proteinasi K (30 U / mg; Promega, WI, USA) a una concentrazione finale di 50 μg / ml a 37 ° C per 30 minuti. Campioni di miele trattati con catalasi e proteinasi K sono stati quindi utilizzati nel dosaggio antibatterico per determinare i valori di MIC contro S. aureus e P. aeruginosa .

Per determinare l’efficacia di entrambi gli enzimi, l’accumulo di H 2 O 2 èstato misurato in campioni trattati con catalasi dopo 24 ore di incubazione a 37 ° C e la presenza di GOX e Def-1 in campioni trattati con proteinasi K sono stati determinati mediante analisi immunoblot (vedi 2.9.).


Determinazione dell’attività GOX

L’attività GOX derivata dalle api è stata determinata con un kit di dosaggio Megazyme GOX (Megazyme International Ireland Ltd., Bray, Irlanda), che si basa sulla catalisi ossidativa del β-D-glucosio a D-glucono-δ-lattone, con la versione concomitante di H 2 O 2 . L’H 2 O 2risultante reagisce con acido p-idrossibenzoico e 4-amminoantipirina in presenza di perossidasi per formare un complesso colorante chinoneimmino, che ha un forte potere assorbente a 510 nm. L’attività enzimatica è stata determinata in soluzioni di miele al 20% (peso / volume) in una micropiastra a 96 pozzetti secondo le istruzioni del produttore.


Determinazione della concentrazione di H 2 O 2

La concentrazione di H 2 O 2 nei campioni di miele è stata determinata con un kit di dosaggio Megazyme GOX (Megazyme International Ireland Ltd), che si basa sulla versione H 2 O 2 . Per uno standard, è stato utilizzato H 2 O 2 diluito a 9,8-312,5 μM. In breve, le soluzioni di miele al 40% (p / v) sono state incubate a 37 ° C per 24 ore. Ogni campione di miele e standard è stato testato in duplicato in una micropiastra da 96 pozzetti e l’assorbanza è stata misurata a 510 nm utilizzando il lettore di micropiastre Synergy HT (BioTek Instruments, VT, USA).


Quantificazione di Def-1

Il peptide derivato dall’ape Def-1 è stato quantificato come descritto da Valachova et al . (2016). In breve, le diluizioni seriali di ciascun campione di miele sono state preparate da una soluzione al 50% (p / v) di miele, con una conseguente concentrazione finale di 2,5, 5 e 10%. Un saggio di immunoassorbimento legato all’enzima (ELISA) è stato eseguito utilizzando un anticorpo di Dif-1 policlonale anti-honeybee di coniglio sollevato contro un peptide sintetico corrispondente al C-terminale dell’ape Def-1 (CRKTSFKDLWDKRFG) 24 . La quantità di Def-1 misurata è stata espressa come percentuale delle proteine ​​totali, che sono state misurate usando il test Quick Start Bradford Protein (Bio-Rad, CA, USA) in base alle istruzioni del produttore. Tutte le misurazioni sono state eseguite in triplice copia e ripetute tre volte.


Contenuto fenolico totale

Il contenuto fenolico totale è stato determinato con un kit di dosaggio della quantificazione dei contenuti fenolici di Folin Ciocalteu (BioQuoChem, Spagna) in una soluzione di miele al 20% (peso / volume) in una micropiastra a 96 pozzetti secondo le istruzioni del produttore. L’acido gallico (GAE) è stato utilizzato come standard di riferimento ei risultati sono stati espressi come equivalenti GAE (mg / ml). L’assorbanza è stata misurata a 700 nm a 37 ° C.


Rilevamento di GOX e Def-1 mediante immunoblotting

Aliquote (15 μl) di soluzione di miele al 50% (p / v) con o senza proteinasi K sono state risolte mediante elettroforesi su gel dodecil solfato-poliacrilammide (SDS-PAGE) e tricina-SDS-PAGE 16,5% utilizzando una elettroforesi Mini-Protean II cellula (Bio-Rad). Le proteine ​​sono state trasferite su una membrana Advantec nitrocellulosa 0,22-μm (Sigma-Aldrich) in Tris 48 mM, glicina 39 mM e metanolo al 20% usando la procedura di asciugatura semi-secca. La membrana è stata bloccata per 1 ora in un tampone di tampone salino-Tween (TBST) tris-tamponato (Tris-HCl 50 mM, pH 7,5, NaCl 200 mM e Tween 20 0,05%) contenente 5% di latte essiccato senza grassi e incubato durante la notte con un anticorpo policlonale di coniglio contro honeybee GOX o Def-1 (1: 2000 in TBST). Dopo il lavaggio con TBST, le membrane sono state incubate per 2 ore in tampone bloccante contenente anticorpi contro la perossidasi di rafano di capra anti-coniglio (1: 2500 in TBST; Promega). Bande immunoreattive sono state rilevate in una soluzione contenente compresse di SigmaFast 3,3-diamminobenzidina disciolte (Sigma-Aldrich) o rilevate mediante kit Immobilon Western (chemio-luminescenza avanzata) Millipore (MA, USA).


Analisi statistica

Un modello misto lineare generale è stato utilizzato per analizzare le differenze nei valori MIC dopo il trattamento con catalasi e proteinasi K, nonché campioni non trattati. Poiché ogni campione è stato testato per ciascun trattamento e sia P. aeruginosa che S. aureus , l’identità dei campioni è stata controllata includendo una parte casuale del modello con l’ID del campione. Questo approccio ha permesso l’esclusione della variabilità inter-campione. Un ambiente di programmazione e statistica R è stato utilizzato per analisi statistiche ( www.R-project.org ). Il modello misto lineare generale è stato analizzato con il pacchetto lme4 41. Le correlazioni tra tutti i parametri sono state testate con il pacchetto Hmisc (pacchetto R versione 4.1-1) usando correlazioni di rango Spearmans non parametriche. Le correlazioni con coefficiente di correlazione r> 0.7 o <-0.7 sono state considerate importanti.

[Tratto da: www.nature.com ]

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[Tratto da: www.cochranelibrary.com ]